بهینه سازی بیان هورمون رشد انسانی با استفاده از روش القای خودکار

سال انتشار: 1396
نوع سند: مقاله کنفرانسی
زبان: فارسی
مشاهده: 537

فایل این مقاله در 11 صفحه با فرمت PDF قابل دریافت می باشد

استخراج به نرم افزارهای پژوهشی:

لینک ثابت به این مقاله:

شناسه ملی سند علمی:

CHCONF05_330

تاریخ نمایه سازی: 2 تیر 1397

چکیده مقاله:

هورمون رشد انسانی (hGH) یکی از مهمترین هورمون های ترشح شده از غده هیپوفیز بوده است. این هورمون متشکل از 191 اسید آمینه و دارای جرم مولکولی 22kDa و همچنین دارای 4 ساختار هلیکسی و دو پیوند دی سولفیدی است. [ 1,2 ] ایده القای خودکار به عنوان راه مناسبی برای انجام تولید پروتیین نوترکیب بدون افزودن القاگر برای سیستم های بیان کنترل شده lac اپرون معرفی شد.[ 3] در این پژوهش از باکتری E.coli و سویه Rosetta-gami حاوی pET32a(+)+hGH+Trx+His6 برای تولید پروتیین هدف به صورت محلول در سیتوپلاسم استفاده شد. بهینه سازی گلوکز، لاکتوز و گلیسرول موجود در محیط خود القا با استفاده از طراحی آزمایش به روش سطح پاسخ توسط نرم افزار دیزاین اکسپرت بررسی گردید. برای بررسی میزان بیان پروتیین هدف از آنالیز ژل الکتروفورز SDS-PAGE استفاده گردید و تحلیل ژلها با استفاده از نرم افزار CLIQS صورت پذیرفت. در دمای 25 درجه سانتیگراد و در زمان 21/5 ساعت درصد بیان حدودا برابر با 40% و مقدار پروتیین تولیدی برابر با 0/695mg/ml بوده است.

نویسندگان

فاطمه راسخی گیلانی

دانشجوی کارشناسی ارشد مهندسی شیمی بیوتکنولوژی،پژوهشکده علوم و فناوری زیستی، دانشگاه صنعتی مالک اشتر، تهران، ایران

علی بهرامی

استادیار گروه مهندسی شیمی بیوتکنولوژی، پژوهشکده علوم و فناوری زیستی، دانشگاه مالک اشتر، تهران، ایران

علی اصغر دلدار

استادیار گروه مهندسی ژنتیک، پژوهشکده علوم و فناوری زیستی، دانشگاه مالک اشتر، تهران، ایران