بررسی بیان ژن در شرایط تنش سرما در گیاه بنفشه با استفاده از روش نمایش افتراقی

در این تحقیق تفاوت بیان ژن در شرایط دماهای پائین 5، صفر، 5- و 10- درجه سانتیگراد نسبت به دمای شاهد 25 درجه سانتیگراد، برای یک گونه دورگ بنفشه به نام Viola wittrockiana به دلیل مقاومت بالای آن به شرایط سرما و یخبندان بررسی شده است. از نمونه های برگی مربوط به هر تیمار دمایی کل RNA استخراج شده و از روی RNA استخراج شده به کمک سه آغازگر اولیگو dT و با کمک واکنش رونویسی معکوس) cDNA, (RT-PCR تک رشته ای ساخته شد. برای تکثیر cDNA با استفاده از آغازگر اولیگو و 8 آغازگر انتخابی، واکنش PCR صورت گرفت و سپس محصول PCR بر روی ژل پلیاکریلآمید غیر واسرشت ساز 19 درصد الکتروفورز گردید. رنگ آمیزی ژل به کمک نیترات نقره انجام شد. تفاوت در تعداد و نوع باندهای مربوط به هر تیمار دمایی، تفاوت در بیان ژن نمونه های مربوط به تیمارهای مختلف دمایی را نشان می دهد.

کلیدواژه ها:

بنفشه ، تنش سرما ، روش نمایش افتراقی ، الگوی بیان ژن