کلونینگ و بیان سابیونیت P28 اینترلوکین 27 انسانی

اینترلوکین 27(IL-27) یک سایتوکاین جدید است که یکی از اعضای مشترک از خانواده های اینترلوکین 12 و 23 به حساب می آید و به وسیله سلول های عرضه کننده آنتی ژن ترشح می شود. هترودایمری شامل دو سایبونیت p28 و (EBI3)Eqstein-Barr-induced gene 3 است. مطالعات اخیر ظرفیت های جدیدی را برای IL-27 از جمله تحریک خون سازی، افزایش بروز آنتی بادی به وسیله سلول های نمایش دهنده آنتی بادی (APCS)، سرکوب رگزایی در تومورهای والد و متاستازها، سرکوب همانند سازی HIV تشخیص داده است. از آنجا که IL-27 از عوامل ضد التهاب است و تعداد لنفوسیت های TH17 را کم و بیان IL-17 را مهار می کند، به نظر می رسد می توان به عنوان یک پتانسیل درمانی برعلیه بیماری های خود ایمنی معرفی شود و در درمان multiple sclerosis و arthritis rheumatoid، ایدز و سرطان به عنوان دارو استفاده شود. مواد و روشها: توالی نوکلئوتیدی ژن P28 سایبونیت تکیل دهنده اینترلوکین 27 در وکتور پلاسمیدی سفارش داده شد. جهت کلون مجدد در وکتور بیانی، پلاسمیدهای حاوی ژن با پرایمرهای دارای جایگاه ا ثربرای آنزیمهای BamH1 و PCR, sac1 شد و در وکتور pet Duet1 کلون گردید. p28 نوترکیب با القای IPTG در سلول بیانی باکتریایی بیان شد. در نهایت تأئید بیان پروتئین با Western Blot صورت گرفت. نتیجه و بحث: p28 در وکتور مورد نظر کلون شد پروتئین بیان شده هم بر روی ژل SDS-PAGE مشاهده شد و توسط آنتی بادی His Tag با وسترن بلانینگ تأئید گردید.

کلیدواژه ها:

اینترلوکین p28-27 ، کلونینگ ، بیماریهای اتوایمیون