همسانه سازی و بیان ژن متالوتیونین smtA در میزبان E.coli

سال انتشار: 1391
نوع سند: مقاله کنفرانسی
زبان: فارسی
مشاهده: 665

فایل این مقاله در 6 صفحه با فرمت PDF قابل دریافت می باشد

استخراج به نرم افزارهای پژوهشی:

لینک ثابت به این مقاله:

شناسه ملی سند علمی:

CIGS12_0801

تاریخ نمایه سازی: 5 بهمن 1392

چکیده مقاله:

مقدمه: یکی از استراتژیهای حفاظتی ارگانیسمها در برابر آسیب های ناشی از فلزات در سطح مولکولی و سلولی القای سنتز متالوتیونینها (MT) است. این پروتئینها می توانند باعث خنثی شدن مقادیر اضافه فلزات سنگین در سلول شده و از ساختارهای سلول در مقابل میانکنشهای غیراختصاصی با فلزات سنگین محافظت کنند. در حال حاضر از باکتریها و گیاهان و محصولات پروتئینی آنها به منظور برداشت فلزات سنگین از محیط استفاده می شود. هدف: هدف از این مطالعه، همسانه سازی ژن متالوتیونینsmtA از باکتتری Synechococcus PCC7942 و بیان آن می باشد. روشها: ژن smtA از طریق اتصال اولگونوکلئوتیدهای مربوطه (سفارش و خریداری از شرکت TAG Copenhagen) توسط تکنیک Overlapping PCR سنتز و در ناقل همسانه سازی T/A، همسانه سازی و در باکتری (E.coli(DH5α تراریخت شد. صحت تراریختی با Colony-PCR بررسی و توالییابی انجام شد. سپس ژن به داخل ناقل بیانی pET15b زیرهمسانه سازی و در باکتری (E.coli(BL21 تراریخت گردید. القای بیان ژن توسط IPTG انجام شد و تولید پروتئین توسط SDS-PAGE بررسی شد. نتایج: توالی یابی، صحت تراریختی را تأئید کرد. SDS-PAGE نشان داد که تولید پروتئین نسبت به نمونه کنترل، بیشتر شده است.

کلیدواژه ها:

نویسندگان

آمنه مهری قهفرخی

دانشجوی کارشناسی ارشد، گروه ژنتیک، دانشکده علوم، دانشگاه شهرکرد

بهناز صفار

گروه ژنتیک، دانشکده علوم، دانشگاه شهرکرد- پژوهشکده زیست فناوری، شهرکرد

محسن مبینی دهکردی

گروه ژنتیک، دانشکده علوم، دانشگاه شهرکرد

محسن پولادیان

دانشجوی کارشناسی ارشد، گروه ژنتیک، دانشکده علوم، دانشگاه شهرکرد

مراجع و منابع این مقاله:

لیست زیر مراجع و منابع استفاده شده در این مقاله را نمایش می دهد. این مراجع به صورت کاملا ماشینی و بر اساس هوش مصنوعی استخراج شده اند و لذا ممکن است دارای اشکالاتی باشند که به مرور زمان دقت استخراج این محتوا افزایش می یابد. مراجعی که مقالات مربوط به آنها در سیویلیکا نمایه شده و پیدا شده اند، به خود مقاله لینک شده اند :
  • Blindauer CA. Bacterial metal lothioneins : past, present, and questions ...
  • Bonaventura C., Johnson F.M B ioremediation today and tomorrow, 1997. ...
  • Ceratto N., Dondero F., Loo J.W., Burlando B., Viarengo A. ...
  • Hajjari M., Saffar B. The Construction of a Short Gene ...
  • Hijova E. M etallothioneis and zinc: their functions and interactions, ...
  • Romero-Isar N. Advances in the structure and chemistry of metallothi ...
  • Sambrook J., Russell DW., 2001. Molecular Cloning; A Laboratory Manual, ...
  • Shi J., Lindsay W.P., Huckle J.W., Morby A.P., Robinson N.G. ...
  • Wang J.L..Chen C. Biosorption of heavy metals removal and their ...
  • -M. Sc..Department of Genetic, Faculty of Science, Shahrekord University ...
  • Department of Genetic, Faculty of Science, Shahrekord University ...
  • Biotechnology Research _ _ _ University ...
  • نمایش کامل مراجع