ردیابی و تکثیر ژن توماتیناز در نژاد 1 قارچ Fusarium oxysporum f.sp. Melonis

قارچ ها جهت غلبه بر سیستم دفاعی گیاه از ابزار مختلفی بهره می گیرند. ترکیبات فیتوآنتیسیپین از جمله مواد دفاعی است که در گیاه جهت جلوگیری از حمله پاتوژن ها تولید می شود. آنزیم توماتیناز جهت تجزیه فیتوآنتیسیپین و غلبه بر سیستم دفاعی گیاه توسط طیفی از قارچ ها از جمله تعدادی از فرم های اختصاصی قارچ Fusarium oxysporum تولید می شود. با توجه به جایگاه خربزه در شاورزی استان خراسان و اهمیت بیماری زردی و پژمردگی آوندی خربزه در این مطالعه حضور ژن توماتیناز در جدایه های مربوط به نژاد یک 1 قارچ F. oxysporum f. sp. Melonis با هدف تکثیر و کلونینگ توالی ژنومی آن انجام شد. بدین منظور پرایمرهای اختصاصی PSh30-F/R بر اساس توالی ژن توماتیناز در فرم های اختصاصی F. oxysporum f. sp. Lycopersici پس از انتخاب مناطق اختصاصی در بالا دست و پائین دست توالی ژن طراحی شد. در الگوی الکتروفورزی محصول PCR جدایه ها تک باند به اندازه حدود 1.1 کیلوباز تکثیر شد که با قطعه مورد انتظار انطباق داشت. قطعه مورد نظر جهت مطالعات تکمیلی در وکتور کلونینگ pTG19-T کلون شد و به وسیله تکنیک کلنی PCR با استفاده از پرایمرهای اختصاصی و همچنین پرایمرها یونیورسال M13-F/R تأئید شد. کلون های بدست آمده جهت توالی یابی و آنالیز بیشتر در مطالعات تکمیلی مورد استفاده قرار خواهند گرفت.

کلیدواژه ها:

خربزه ، بیماری زردی و پژمردگی آوندی خربزه ، ژن توماتیناز ، ردیابی ژن