ساخت سازه بیانی گیاهی حاوی ژنهای2pgip و 42 chit بهصورت توأم

سال انتشار: 1393
نوع سند: مقاله کنفرانسی
زبان: فارسی
مشاهده: 632

فایل این مقاله در 5 صفحه با فرمت PDF قابل دریافت می باشد

استخراج به نرم افزارهای پژوهشی:

لینک ثابت به این مقاله:

شناسه ملی سند علمی:

CIGS13_0714

تاریخ نمایه سازی: 7 بهمن 1393

چکیده مقاله:

پاتوژنهای قارچی با گسترش وسیع و سریعی که دارند خسارات فراوانی را به محصولات کشاورزی وارد میکنند. یکی از روشهای مبارزه با بیماریهای قارچی استفاده از مهندسی ژنتیک برای انتقال ژنهای رمزکننده آنزیمهای هیدرولازی از قبیل کیتینازها و ژنهایمهاری آنزیمهای پکتینازی قارچی از قبیل پروتئین مهارکننده آنزیم پلیگالاکتوروناز، به گیاهان زراعی میباشد. در این تحقیق از ژنهای کیتینازchit42 حاوی دمین متصلشونده به کیتین) و 2pgipبهترتیب جدا شده از قارچTrichoderma atrovirideو گیاهPhaselus vulgaris جهت ساخت سازه بیانی گیاهی واجد هر دو ژن مذکور تحت کنترل پروموترCaMV 35Sو ترمیناتور نوپالین سینتازNOS بهصورت جداگانهpBIMZ2 استفاده شده است. برای این منظور ابتدا ژن 42 chitتوسط آغازگرهای اختصاصی دو طرف سازه حاوی جایگاه آنزیمیEcoRIتکثیر و در ناقل pJETهمسانهسازی شد. سپس این سازه به روش هضم آنزیمی به صورت خطی در آمده و در جایگاه EcoRIناقلPBI121حاوی ژن(pBIAH23) pgip2 همسانهسازی شد. ناحیه اضافی به روش هضم بخشی جدا شد و در نهایت برای تأیید سازهpBIMZ2 از روشهایPCRالگوی هضم آنزیمی وreplica platingاستفاده شد که در هر سه روش حضور ژنchit42 به طول 1497 جفتباز وpgip2 به طول 1002 جفتباز تأیید شد. از سازههای ساخته شده در این تحقیق میتوان برای پروژههای انتقالژن به گیاهان مدل و زراعی برای بررسی اثرات توأم این ژنها و تولید گیاهان تراریخت مقاوم در برابر قارچها استفاده کرد

کلیدواژه ها:

سازهی بیانی گیاهی ، ، pgip 2 ، chit42 ، دمین متصل شونده به کیتین ، روشreplica plating

نویسندگان

محبوبه ضیائی

تهران، پژوهشگاه ملی مهندسی ژنتیک و زیست فناوری

نسیم زرین پنجه

تهران، پژوهشگاه ملی مهندسی ژنتیک و زیست فناوری

مصطفی مطلبی

تهران، پژوهشگاه ملی مهندسی ژنتیک و زیست فناوری

محمدرضا زمانی

تهران، پژوهشگاه ملی مهندسی ژنتیک و زیست فناوری

مراجع و منابع این مقاله:

لیست زیر مراجع و منابع استفاده شده در این مقاله را نمایش می دهد. این مراجع به صورت کاملا ماشینی و بر اساس هوش مصنوعی استخراج شده اند و لذا ممکن است دارای اشکالاتی باشند که به مرور زمان دقت استخراج این محتوا افزایش می یابد. مراجعی که مقالات مربوط به آنها در سیویلیکا نمایه شده و پیدا شده اند، به خود مقاله لینک شده اند :
  • Akhgari A.B., Motallebi M., Zamani M.R (2012). Bean Po lygal ...
  • Arakane, Y., Q. Zhu, et al. (2003). "Properties of catalytic, ...
  • Di Matteo A, Bonivento D, Tsernoglou D, Federici L, Cervone ...
  • D"Ovidio R., Mattei B., Roberti S. and D. Bellincampi. (2004). ...
  • Duo-Chuan, L. (2006). Review of fungal chitinases. Mycop athologia 161, ...
  • Federici L, Di Matteo A, Fernand ez-Recio J, Tserniglou D, ...
  • Martin, K., McDougall, B.M., McIIroy, S., Jayus, Chen, J, and ...
  • Neuhaus J. (1999). Plant chitinases. In: Datta S.K., Muthukrishnar S., ...
  • Scholten O. E, Panella LW, De Bock T. S and ...
  • Theis, T., and Stahl, U. (2004). Antifungal proteins: Targets, mechanisms ...
  • نمایش کامل مراجع