ساخت ذرات فاژیM13 هدفمندسازی شده با ترانسفرین به روش اتصال شیمیایی جهت انتقال ژن به سلول های یوکاریوتی

انتقال هدفمند ناقال ها و حامل های ژنی به سلول ها و بافت های خاص یکی از مهمترین مسائل در آزمایش های ژن درمانی است. باکتریوفاژها حامل های ژنی مناسبی هستند و روش های مختلفی برای انتقال هدفمند آنها به سلول های مورد نظر وجود دارد. در این مطالعه تهیه ذرات فاژی هدفمند شده بر پایه فاژM13 به روش اتصال شیمیایی ارائه می شود. توالی کد کنندهGFPپس از تکثیر با PCRدر ناقل فاژمیدیpCMV-Script EXتحت پروموترCMVوارد شد. سازه حاصل به باکتریE.coliسویهXL1-Blue MRF’ترانسفورم شد و سپس با استفاده از فاژ هلپرKO7ذرات فاژی حاویGFPتولید شدند. سپس ملکول های ترانسفرین انسانی با روش اتصال شیمیایی آمیناسیون احیایی به سطح ذرات فاژی حاویGFPاتصال داده شدند. بررسی ها با میکروسکوپ الکترونی انتقالی و نیزphage-ELISAاتصال ملکول های ترانسفرین به سطح ذرات فاژی را تأیید کردند. همچنین آزمایشاتcell-ELISAنشان دادند که ملکول های ترانسفرین نمایش داده شده در سطح ذرات فاژی می توانند با گیرنده های ترانسفرین موجود در سطح سلول های رده AGSبرهمکنش کرده، به آنها متصل شوند. کارآیی ذرات فاژی هدفمندسازی شده حاویGFPدر انتقال و بیان ترانسژنGFPدرسلول هایAGSدر حال بررسی است

کلیدواژه ها:

اتصال شیمیایی ، ذرات فاژی ، انتقال ژن ، هدفمندسازی