كلونينگ و تعيين خصوصيات آنزيم متيل گلي اكسال سنتاز از يك گونه ترموفيل ايراني به عنوان آنزيم كليدي در توليد 1 و - 2 پروپان دي ال  Fulltext 

[ محمد پاژنگ ] - دانشجوي دكتري بيوشيمي، گروه بيوشيمي، دانشكده علوم پايه، دانشگاه تربيت مدرس، تهران، ايران
[ سيدمحسن اصغري ] - دانشجوي دكتري بيوشيمي، گروه بيوشيمي، دانشكده علوم پايه، دانشگاه تربيت مدرس، تهران، ايران
[ ارسطو بدويي دلفارد ] - دانشجوي دكتري بيوشيمي، گروه بيوشيمي، دانشكده علوم پايه، دانشگاه تربيت مدرس، تهران، ايران
[ خسرو خواجه ] - دانشيار بيوشيمي، گروه بيوشيمي، دانشكده علوم پايه، دانشگاه تربيت مدرس، تهران، ايران

خلاصه مقاله:

در آمريكا ساليانه حدود پانصد هزار تن 1 و - 2 پروپان دي ال ( پروپيلن گليكول ) در صنايعي همچون شوينده، داروسازي، آرايشي و همچنين به عنوان ضد يخ مصرف مي شود . در روش هاي معمول 1 و - 2 پروپان دي ال از طريق آبدهي پروپيلن اكسيد توليد مي شود، اما تخمير ميكروبي يكي از روش هاي سودمند در توليد اين ماده از مواد ارزان قيمت و تجديد پذير است . امروزه براي افزايش توليد ميكروبي 1 و - 2 پروپان دي ال از روش هاي مهندسي متابوليك استفاده مي كنند . آنزيم متيل گلي اكسال سنتاز در مسير توليد اين ماده در باكتري ها، نقش كليدي داشته و باعث
جهت يابي متابوليسم باكتري به طرف توليد 1 و - 2 پروپان دي ال مي شود . در اين م طالعه آنزيم متيل گلي اكسال سنتاز از يك گونه ترموفيل ايراني تعيين توالي شد . ژن مورد نظر حاوي 399 نوكلئوتيد بوده و پلي پپتيد 132 E.coli BL21 (DE3) منتقل و در ميزبان pET 28a (+( آمينواسيدي را رمزدهي مي كند . اين ژن به وكتور بياني بيان گرديد . آنزيم بيان شده با شوك حرارتي و به دنبال آن با استفاده از ستون كروماتوگرافي تمايلي خالص شد و خصوصيات سينتيكي آنزيم با استفاده از دي هيدروكسي استون فسفات به عنوان سوبسترا مورد ارزيابي قرار گرفت .
با بررسي خصوصيات سينتيكي آنزيم، Km و Vmax آنزيم به ترتيب 0 / 36 mM و 0 / 4 μmol min -1 μg -1 و با تعيين فعاليت آنزيم در دماهاي مختلف، دماي بهينه فعاليت آنزيم 75 °C به دست آمد . اين آنزيم در مقايسه با آنزيم هايي كه قبلا گزارش شده از پايداري حرارتي بالاتري برخوردار است

1 و - 2 پروپان دي ال ، متيل گلي اكسال سنتاز، كلونينگ، خصوصيات سينتيكي