مطالعه تاثیر ضد قارچی اسانس آویشن باغی (Thymus vulgaris L.) علیه آسپرژیلوسنایجر در شرایط آزمایشگاهی

مقدمه: استفاده از گیاهان دارویی در درمان برخی از بیماری ها به دلیل عوارض کمتر نسبت به داروهای شیمیایی توجه بسیاری از افراد را به خود جلب کرده و سعی در توسعه و گسترش آنها شده است. که بیشتر از اسانس و عصاره ی این گیاهان استفاده می شود. گیاه آویشن باغی (thymus vulgaris (یکی از گیاهان تیره نعناعیان (lamiaceae(است. اسانس این گیاه سرشار از ترکیبات فنولی و روغن های فرار می باشد. که دارای اثرات ضد قارچی و ضد میکروبی و همچنین ضد سرفه وخلط آور است. روش کار: در این مطالعه اسانس بدست آمده از آویشن باغی جهت بررسی فعالیت ضدقارچی علیه آسپرژیلوس نایجر به روش مایکرودایلوشن براث استفاده شد. بدین منظور ابتدا 100 گرم آویشن باغی آسیاب و به وسیله دستگاه کلونجر اسانس آن تهیه گردید. برای مطالعه رفتار رشد قارچ مورد نظر و تعیین حداقل غلظت ممانعتکنندگی از رشد(MIC (و نیز حداقل قدرت قارچکشی (MFC (اسانس آویشن باغی از روش های استاندارد ماکرودایلوشنبراث(رقیقسازی در محیط مایع) استفاده شد. برای رقتسازی در لوله، ابتدا محیط سابورو دکستروز براث به میزان 5سیسی به 11 لوله ونوجکت اضافه شد. مقدار 100 میکرولیتر اسانس به 9/9 سیسی سابورو دکستروز براث در لوله اول اضافه گردید بعد از شیکر دادن لوله، مقدار 5 سیسی از لوله اول به لوله دوم و سپس به لوله بعدی و درنهایت تا1 لوله دهم تکرار شد در هر لوله سریالهای2رقت لوله قبلی تهیه گردید. دو لوله هم به عنوان شاهد در نظر گرفته شد.غلظتهای به دست آمده از هر اسانس در محیط کشت سابورو دکستروز براث شامل 10 ،5 ،5/2 ،25/1 ،62/0 ،31/0 ،15/0 ،07/0 ،03 /0 و 01/0 میکرولیتر بر میلیلیتر به دست آمد (رقتسازی در سه تکرار انجام شد). برای تهیه سوسپانسیون قارچی ابتدا قارچ روی محیط کشت جامد سابورو دکستروز آگار کشت دادهشد و در دمای 25 درجهی سانتیگراد به مدت 4-3 روز نگهداری شد سپس از کلنیهای رشد کرده، سوسپانسیون قارچی تهیه گردید برای این کار به سطح کلنی رشد کرده در محیط جامد، مقداری سرم فیزیولوژی اضافه و بعد از مدتی با پیپت پاستور استریل از سطح محیط برداشته شد. از کلنی خالص قارچ آسپرژیلوس نایجر ایجاد شده در محیط کشت نمونه ای تهیه گردید و به سرم فیزیولوژی دارای تویین80 اضافه شد. بعد از جداسازی اسپور، برای تهیه سوسپانسیون قارچی با استفاده از دستگاه اسپکتروفتومتر در طول موج520 نانومتر میزان عبور نور از سوسپانسیون، مورد سنجش 6 قرار گرفت (میزان عبور نور 90 %برای به دست آوردن سوسپانسیونی با تقریبا 10 اسپور قارچی در هر میلیلیتر مورد نیاز است). در نهایت به هر کدام از لوله ها مقدار 10 میکرولیتر از سوسپانسیون قارچی اضافه گردید و 24-48ساعت در انکوباتور نگهداری شد. بعد از این مدت با روش کدورت سنجی چشمی کمترین رقتی که کدورتی در آن مشاهده نشد MIC در نظر گرفته شد و از MIC و دو رقت کمتر روی محیط سابورو دکستروز آگار شت داده شد و بعد از انکوباسیون رقتی که هیچ گونه رشدی روی محیط جامد نداشت به عنوان MFC به دست آمد. حداقل غلظت ممانعت کننده از رشد (MIC (و حداقل قدرت قارچکشی (MFC (اسانس آویشن باغی به ترتیب 02/0±05/0 و 09/0±2/0میکرولیتر بر میلیلیتر اندازهگیری گردید.بحث و نتیجه گیری: نتایج این تحقیق حاکی از تاثیر اسانس آویشن باغی بر روی قارچ مورد آزمایش بود.

کلیدواژه ها:

اسانس آویشن باغی ، آسپرژیلوس نایجر ، ضدقارچی