بررسی تاثیر ضد قارچی اسانس آویشن باغی (Thymus vulgaris L.) علیه آسپرژیلوسفلاووس در شرایط آزمایشگاهی

مقدمه: اسانسها، مواد طبیعی ارگانیکی هستند که نه تنها ایمن اند، بلکه در حفاظت از محیط زیست نیز موثر هستنددر بین اسانسهای گیاهی مختلف، اسانسهای آویشن باغی و آویشن شیرازی تاثیر زیادی در برابر قارچها و باکتریهادارند. آسپرژیلوسها از مهمترین قارچهای موجود در محیط میباشند که تقریبا در انواع ترکیبات و مواد آلی قابلیت رشددارند و کونیدی آنها به مقدار فراوان در آب و خاک و هوا پراکنده است.روش کار: در این مطالعه اسانس بدست آمده از آویشن باغی جهت بررسی فعالیت ضدقارچی علیه آسپرژیلوس فلاووس به روش مایکرودایلوشن براث استفاده شد. بدین منظور ابتدا 100 گرم آویشن باغی آسیاب و به وسیله دستگاه کلونجر اسانس آن تهیه گردید. برای مطالعه رفتار رشد قارچ مورد نظر و تعیین حداقل غلظت ممانعتکنندگی از رشد (MIC(و نیز حداقل قدرت قارچکشی (MFC (اسانس آویشن باغی از روش های استاندارد ماکرودایلوشنبراث (رقیقسازی درمحیط مایع) استفاده شد. برای رقتسازی در لوله، ابتدا محیط سابورو دکستروز براث به میزان 5 سیسی به 11 لوله ونوجکت اضافه شد. مقدار 100 میکرولیتر اسانس به 9/9 سیسی سابورو دکستروز براث در لوله اول اضافه گردید بعد از شیکر دادن لوله، مقدار 5 سیسی از لوله اول به لوله دوم و سپس به لوله بعدی و درنهایت تا لوله دهم تکرار شد در هر 1 لوله سریالهای 2رقت لوله قبلی تهیه گردید. دو لوله هم به عنوان شاهد در نظر گرفته شد. غلظتهای به دست آمده و 0 /03 ،0/07 ،0/15 ،0/31 ،0/62 ،1/25 ،2/5 ،5 ،10 شامل براث دکستروز سابورو کشت محیط در اسانس هر از01/0 میکرولیتر بر میلیلیتر به دست آمد (رقتسازی در سه تکرار انجام شد). برای تهیه سوسپانسیون قارچی ابتدا قارچ روی محیط کشت جامد سابورو دکستروز آگار کشت دادهشد و در دمای 25 درجهی سانتیگراد به مدت 4-3 روز نگهداری شد سپس از کلنیهای رشد کرده، سوسپانسیون قارچی تهیه گردید برای این کار به سطح کلنی رشد کرده در محیط جامد، مقداری سرم فیزیولوژی اضافه و بعد از مدتی با پیپت پاستور استریل از سطح محیط برداشته شد. از کلنی خالص قارچ آسپرژیلوس فلاووس ایجاد شده در محیط کشت نمونه ای تهیه گردید و به سرم فیزیولوژی دارایتویین80 اضافه شد. بعد از جداسازی اسپور، برای تهیه سوسپانسیون قارچی با استفاده از دستگاه اسپکتروفتومتر در طول موج 520 نانومتر میزان عبور نور از سوسپانسیون، مورد سنجش قرار گرفت (میزان عبور نور 90 %برای به دست 6 آوردن سوسپانسیونی با تقریبا 10 اسپور قارچی در هر میلیلیتر مورد نیاز است). در نهایت به هر کدام از لوله ها مقدار10 میکرولیتر از سوسپانسیون قارچی اضافه گردید و 24-48 ساعت در انکوباتور نگهداری شد. بعد از این مدت با روش کدورت سنجی چشمی کمترین رقتی که کدورتی در آن مشاهده نشد MIC در نظر گرفته شد و از MIC و دو رقت کمتر روی محیط سابورو دکستروز آگار کشت داده شد و بعد از انکوباسیون رقتی که هیچ گونه رشدی روی محیط جامد نداشت به عنوان MFC به دست آمد. حداقل غلظت ممانعت کننده از رشد (MIC (و حداقل قدرت قارچکشی(MFC(اسانس آویشن باغی به ترتیب 02/0±04/0 و 04/0±12/0میکرولیتر بر میلیلیتر اندازهگیری گردید.بحث و نتیجه گیری: نتایج این تحقیق حاکی از تاثیر اسانس آویشن باغی بر روی قارچ مورد آزمایش بود.

کلیدواژه ها:

اسانس آویشن باغی ، آسپرژیلوس فلاووس ، ضدقارچی