شناسایی و جداسازی اسید لاکتیک باکتری ها از شیر مادر به روش مولکولی

شیرمادر به عنوان تنها منبع تغذیه در ماه های اول پس از تولد، می تواند عامل مهمی در توسعه میکروارگانیسم های موجود در روده نوزاد باشد. بنابه اهمیت باکتری های اسید لاکتیک به خصوص لاکتوباسیل ها در سلامت انسان، شناسایی مولکولی این باکتری ها می تواند گامی مؤثر در به کارگیری آنها در محصولات فرا ویژه باشد. هدف از این تحقیق، تشخیص و شناسایی سویه های لاکتوباسیلوس موجود در شیر مادر است. در این مطالعه پس از غنی سازی نمونه های شیر در محیط ام آر اس براث، جداسازی و خالص سازی سویه ها در همان محیط کشت صورت گرفت. پس از بررسی های میکروسکوپی با آزمون های بیوشیمیایی از جمله تخمیر قند، تولید گاز و آزمون آنتی بیوگرام، خصوصیات اولیه باکتری ها تعیین شد. در نهایت شناسایی مولکولی بر اساس توالی های 16srRNA و سپس انگشت نگاری ژنومی از طریق REP-PCR انجام شد. باسیل ها و کوکسی های گرم مثبت و کاتالاز منفی شناسایی و بر اساس نمونه و مورفولوزی کلنی کدگذاری گردیدند و در مرحله بعد باکتری هایی که در آزمون های آنتی بیوگرام، تخمیر قند و تولید گاز تفاوت هایی ا خود نشان داده بودند. برای شناسایی مولکولی انتخاب شدند. در نهایت محصولات PCR توالی یابی شدند و توالی ها در نرم افزار BLAST مورد بررسی قرار گرفتند. نتایج توالی یابی با استفاده از سرور EzTaxon آنالیز شد. نتایج نشان داد که سویه های جداشده از نوع پدیوکوکوس لولی، لاکتوباسیلوس رامنوسوس و لاکتوباسیلوس فرمنتوم بودند. شیر مادران می تواند به عنوان منبعی از اسید لاکتیک باکتری های پروبیوتیکی مورد توجه باشد که ممکن است نقش مهمی در پیشگیری ابتلا نوزادان به بیماری های عفونی داشته باشد. از طرفی تحقیق حاضر نشان دهنده کارایی انگشت نگاری ژنومی REP-PCR با کمک نشانگر (5 GTG) در بررسی روابط فیلوژنیک و تنوع ژنتیکی باکتری ها می باشد.

کلیدواژه ها:

شیرمادر ، لاکتوباسیلوس ، REP-PCR ، 16srRNA