شناسایی سویه هایEnteroaggregative Escherichia coliدراسهال کودکان توسط Multiplex PCRوومطالعه قابلیت چسبندگی آن ها به سلول اپی تلیال

زمینه و اهداف : Enteroaggregative Escherichia coli (EAEC) یک پاتوژن روده ای در حال ظهور است که باعث اسهال حاد و مزمن در کودکان می شود . مشخصه EAEC الگوی چسبندگی آجر مانند به سلول های HEp‐ 2 یا HeLa است که برای تشخیص EAEC تست طلایی محسوب می شود. این چسبندگی متمایز از الگوی Enteropathogenic Escherichia coli EPEC و Diffusly Adherent E.coli DAEC است. دراین مطالعه برای تشخیص سویه های EAEC از تست Multiplex PCR mPCRاستفاده شد و نتایج با تست چسبندگی به سلول HeLa مقایسه گردید. روش بررسی : سویه های E. coli از نمونه مدفوع کودکان مبتلا به اسهال در مرکز طبی کودکان تهران جدا و شناسایی آنها طبق روش های استاندارد انجام گرفت . غربالگری اولیه سویه های EAEC بر اساس تست چسبندگی به سلول انجام شد و 170 سویه که به نوعی به سلول چسبندگی داشتند، انتخاب شدند . برای تشخیص سویه های EAEC از تست mPCR استفاده شد ، این تست بر مبنای سه ژن پلاسمیدی aggR ،aaP و AA طراحی شده است . سپس برای تعدادی از سویه های mPCR مثبت و منفی تست اتصال به سلول HeLa انجام گرفت. یافته ها : بر اساس 114mPCR سویه 67 % به عنوان ، EAEC تشخیص داده شدند . ژن های پلاسمیدی aggR ،aaP و AA به ترتیب در 114 (100٪) در 80 (70٪) سویه دیده شدند . بر اساس تست چسبندگی به سلول 53 (9/86٪) سویهmPCR مثبت و 3 (2/27٪) سویهmPCR منفی نیز دارای الگوی چسبندگی آجرمانند بودند. نتیجه گیری : نتایج نشان داد که mPCR قادر است اکثر سویه های EAEC که دارا ،ی الگوی چسبندگی آجر مانند هستند، را تشخیص دهد . این تست قادر است آن دسته از سویه های EAEC را که الگوی آجر مانند را هم نشان نمی دهند، تشخیص دهد . به نظر می رسد که mPCR یک تست سریع وبا ویژگی خوب برای تشخیص سویه های EAEC باشد و به ویژه برای غربالگری تعداد زیاد ایزوله در موارد اپیدمی مناسب می باشد

کلیدواژه ها:

چسبندگی آجر مانند ، EAEC ، Multiplex PCR ، HeLa cells