شناسایی گونه های کاندیدا جدا شده از نمونه خون بیماران مبتلا به کاندیدمی به روش Seminested PCR

شاهدشیوع عفونت های قارچی ازجمله کاندیدا وشیوع بیشتر بیماری ایدز بدخیمی ها وافزایش اختلالات سیستم ایمنی هستیم این امرزمینه را برای افزایش شیوع کاندیدیازیس سیستمیک و سپتی سمی کاندیدایی خصوصا با گونه های غیرآلبیکنس کاندیدا فراهم کرده است هدف ازاین مطالعه تعیین هویت گونه های کاندیدا جداشده ازنمونه های کشت خون بااستفاده ازروش Seminested PCR بود 2516نمونه کشت خون دربیمارستان بقیه الله درسال 1388 ازنظر رشدعوامل مخمری بررسی شد نمونه های مثبت ازجهت حضورکاندیدا باآزمونهای فنوتیپی مورفولوژی بررسی رنگ کلنی روی محیط کروم آگارکاندیا آزمون لوله زایا و تولید کلامیدوسپور و ژنوتیپی Seminested PCRn بررسی شد DNAی همه نمونه ها بطور مستقیم ازکشت خون و بااستفاده ازکیت DNG-plus استخراج شد برای PCR مرحله اول ازپرایمرهای CTSR,CTSF که قطعه Internal Transcribed Spacer2) ITS2 راتکثیر می کند استفاده شد محصول مرحله اول به عنوان DNAی الگو برای انجام PCR مرحله دوم با استفاده ازپرایمرعقبی مرحله اول CTSR و درحضور پرایمرهای اختصاصی گونه به نامهای CGDET CTDET CPDET CADET وCDDET استفاده شد پرایمرهای اختصاصی به ترتیب برای شناسایی گونه های کاندیدا آلبیکنس کاندیدا پاراپسیلوزیس کاندیدا تروپیکالیس کاندیدا گلابراتا و کاندیدا دابلینینسیس بود گونه مخمر باتوجه به الگوی باندهای ایجادشده روی ژل و اندازه آن تشخیص داده شد

کلیدواژه ها:

کاندیداآلبیکنس ، کاندیداهای غیرآلبیکنس ، کشت خون ، ITS2 ، Seminested PCR