طراحی، ساخت و انتقال سازه های ژنی جهت خاموش سازی ژن های F3′5′H و F3′H در انگور رقم شیراز
محل انتشار: فصلنامه علوم باغبانی ایران، دوره: 46، شماره: 1
سال انتشار: 1394
نوع سند: مقاله ژورنالی
زبان: فارسی
مشاهده: 874
فایل این مقاله در 16 صفحه با فرمت PDF قابل دریافت می باشد
- صدور گواهی نمایه سازی
- من نویسنده این مقاله هستم
استخراج به نرم افزارهای پژوهشی:
شناسه ملی سند علمی:
JR_JHS-46-1_001
تاریخ نمایه سازی: 9 اسفند 1395
چکیده مقاله:
به منظور مطالعه عملکرد ژن های F3´5´H و F3´H و برهم کنش آنها در مسیر بیوسنتز فلاونوئیدها در انگور، از طریق طراحی و ساخت سازه های مناسب ایجاد کننده ihpRNA ، لاین های تراریخت حاوی سازه خاموش کننده ژن F3´H و سازه خاموش کننده هر دو ژن F3´5´H و F3´H ایجاد شدند. به این منظور، قطعاتی از دو ژن انتخاب و به صورت تکرارهای معکوس در ناقل pHANNIBAL درج و با بهره گیری از سیستم ناقل دوگانه، هر یک از سازه های تهیه شده وارد ناقل p27 mod GFP 4a شده و به اگروباکتری منتقل شدند. کالوس های جنین زای حاصل از کشت پرچم، توسط کشت توام با اگروباکتری تراریخت شدند. بیان ژن GFP در کالوس های جنین زا، پنج روز پس از تلقیح با میکروسکوپ مشاهده شد. در نهایت از کشت کالوس های جنین زای دارای سازه خاموشی ژن F3′H و سازه خاموشی همزمان F3′H و F3′5′H به ترتیب تعداد 42 و 34 لاین باززایی شدند که براساس واکنش زنجیره ای پلیمراز، 36 لاین برای سازه خاموشی ژن F3′H و 27 لاین برای سازه خاموشی همزمان F3′H و F3′5′H ، مثبت ارزیابی شدند که این نتیجه نشان از کارایی بالای روش باززایی و تراریختی مورد استفاد بود.
کلیدواژه ها:
نویسندگان
مریم پژمان مهر
دانشجوی سابق دکتری و استاد، پردیس کشاورزی و منابع طبیعی دانشگاه تهران، کرج
علی عبادی
دانشجوی سابق دکتری و استاد، پردیس کشاورزی و منابع طبیعی دانشگاه تهران، کرج
امیر موسوی
دانشیار پژوهشگاه ملی مهندسی ژنتیک و زیست فناوری، تهران
دبرا مک دیوید
پژوهشگر و استاد موسسه CSIRO ، ادلاید، استرالیا