به کارگیری آزمون ایمنوفلئورسنت غیر مستقیم جهت تشخیص پادتن های ضدویروس IBR

بیماری IBR یکی از مهمترین و فراوانترین بیماریهای عفونی در جمعیت گاوهای جهان می باشد. وجود چهره های متعدد بالینی در سیستمهای متنوع پرورش گاو وهمچنین طبیعت خاص و ویژه عفونت ناشی از این ویروس که بازتابی از پاتوزنز اغلب عفونتهای هریس ویروسی ا ست اهمیت ویژه ای را به تشخیص آزمایشگاهی این بیماری می دهد. هدف از انجام این تحقیق تهیه کیت ایمونوفلئوروسنت غیرمستقیم جهت تشخیص سرمی بیماری IBR در گاو بود که طی سه مرحله انجام گ رفت. مرحله اول تهیه آنتی گلبولین ضد گاوی نژوگه با فلئورسئین ایزوتیوسیانات بود که با ایمن سازی 10 رأس خرگوش، جداسازی سرم، ترسیب ایمونوگلوبولینها، کنژوگاسیون ایمونوگلبولینهای سرمی با FTTC، جداسازی پادتنهای کنژوگه در روی ستون سفادکس و خالص سازی نهایی آنها در کیسه های دیالیز، انجام گرفت. مرحله بعد تهیه پادگن استاندارد بود که با کشت و تکثیر ویروس IBR در کشت سلولی R-BK، عیار سنجی ویروس، تلخیص و تلغیظ ویروس توسط اولتراسانتریفوژ و تثبیت پادگن ا نجام گرفت. در مرحله سوم کیت حاصله با آزمایش بالغ بر 1000 نمونه سرمی که قبلاً با آزمون SN آزمایش شده بودند، استاندارد گردید طوری که بهترین رقت کنژوگه رقت 1/10، بهترین عیار ویروس عیار 10(5/5)TCID50 تا (5)10 و بهترین رقت سرمی رقت 1/8 به دست آمد. میزان همخوانی دوآزمون SN و IFA برابر با 98/4 درصد محاسبه شد و طبیعتاً اختلاف معنی داری نیز بین این دوآزمون مشاهده نگردید.

کلیدواژه ها:

تورم عونی بینی و نای گاو ، ایمونوفلئوروسانت ، فلئوروسین ایزوتیوسیانات ، آزمون خنثی سازی سرم ، حساسیت و ویژگی