ارزیابی تأثیر دما و ترکیبات محیط کشت بر تولید آنتی ژن کاتالاز در قارچ آسپرژیلوس فومیگاتوس

هدف: بررسی چند عامل بر میزان تولید آنتی ژن کاتالاز از قارچ آسپرژیلوس فومیگاتوس. طرح: مداخله ای. روش: از چهار محیط کشت که به لحاظ نوع ومقدار قند و سایر ترکیبات تشکیل دهنده محیط با یکدیگر متفاوت بودند در دو د مای 28 درجه سانتیگراد و 37 درجه سانتیگراد استفاده گردید. همچنین از دوایزوله بیماریزای انسانی و حیوانی جهت کشت انبوه قارچ استفاده شد. میسلیوم های قارچی پس از 96 ساعت از سطح محیط کشت فیلتر شده سپس با بافر شکننده خرد شده و با دور 15000g سانتریفوژ گردیدند. مایع رویی حاصل به عنوان عصاره محلول در آب محسوب می شود که از آن جهت تخلیص آنتی ژنی استفاده گردید. میزان پروتئین عصاره ها محلول در آب توسط روش برادفور سنجش شد سپس الکتروفورز و رنگ آمیزی اختصاصی با فروسیانید پتاسیم انجام گرفت. عصاره های محلول در آب بر روی ستون مبادله یونی آنیونیک و کاتیونیک قرار گرفتند. جذب نوری خروجیهای ستون و همچنین م قدار پروتئین آنها سنجش شد. خروجیهای ستون کاتیونیک مورد ا لکتروفورز SDS-PAGE قرار گرفته و الگوی الکتروفورزی آنها با یکدیگر مقایسه شد. نتایج: عصاره های محلول در آب حاصل از محیط های چهارگانه دارای 1/3 ±0/1,mg/ml پروتئین در محیط های S و CDA و مقدار پروتئین 1/1 ±0/1mg//mg.ml محیط های YED و AMM بود. عصاره های محلول در آب حاصل از محیط CDA و S پس از قرار گرفتن بر روی ستون تعویض یونی باندهای قویتری نسبت به سایر خروجیهای ستون از دیگر محیط های کشت داشتند. مقدار پروتئین عصاره محلول در آب و همچنین مقدار پروتئین خروجیهای ستون تعویض یونی تحت تأثیر سوه قارچی و دما نبوده در حالیکه ترکیب محیط کشت بر مقدار پروتئین و تراکم باند مؤثر بود. نتیجه گیری: این مطالعه نشان داد، دما و سویه تأثیری در الگوی الکتروفورزی و مقدار پروتئین عصاره های محلول در آب نداشت در حالیکه ترکیب محیط کشت در مقدار پروتئین و تولید آنتی ژن مؤثر است. مجله دانشکده دامپزشکی دانشگاه تهران، (1383)، دوره 59، شماره 1, 78-73.

کلیدواژه ها:

آسپرژیلوس فومیگانوس ، تخلیص ، کاتالاز ، دما ، محیط کشت