اثر تعداد سلو لهای گرانولوزا در محیط کشت در بیان ژن آنزیمهای مؤثردر ساخت هورمو نهای استروییدی

زمینه مطالعه: سلو لهای گرانولوزا دارای نقشی کلیدی در مسیر استروئیدوژنسیز هستند. هدف: از مطالعه حاضر بررسی تراکم سلو لهایگرانولوزا کشت داده شده حاصل از فولیکو لهای 2-5 mm بر تراوش استرادیول و بیان ژ نهای مرتبط با ساخت استرادیول و پروژسترون بود.روش کار: به طور خلاصه، فولیکو لهای 2-5 mm از تخمدان گاوهای بالغ از کشتارگاه جمع آوری شدند، پس از جدا سازی و شمارش سلو لهابا استفاده از رنگ تریپان بلو 4/ 0 %، سلو لهای گرانولوزا در محیط DMEM/F12 به مدت شش روز کشت داده شدند. تیمارها شامل 1( 500هزار سلول در 500m L محیط کشت، 2( 500 هزار سلول در 200 mL محیط کشت، 3( 250 هزار سلول در 500m L محیط کشت و 4( 250هزار سلول در 200m L محیط کشت بود. داد ههای مربوط به بیان ژ نها با استفاده از نرم افزار JMP مورد تجزیه و تحلیل قرار گرفتند. نتایج: درشرایطی که مقدار محیط کشت ثابت بود کاهش تعداد سلو لها )کاهش تراکم( منجر به افزایش غلظت استرادیول گردید و در شرایطی که تعدادسلو لها ثابت بود کاهش محیط کشت )افزایش تراکم( سبب کاهش غلظت استرادیول گردید. میزان پروتئین و RNA استخراجی تفاوتی بینتیمارها نداشت. با کاهش تراکم بیان ژ نهای 17βHSD ،FSHR، CYP19 افزایش و بیان ژ نهای GADD45β و StAR کاهش یافت. نتایجمطالعه حاضر نشان داد کاهش تراکم سلول سبب افزایش تولید استرادیول و همچنین افزایش mRNA کد کننده آنزی مهای استروژنیک گردیدولی بالعکس سبب کاهش بیان mRNA کد کننده آنزی مهای پروژستژنیک ) Progestagenic ( گردید. نتیج هگیر ینهایی: غلظت پروتئین باکاهش تراکم سلول تغییر نکرد در نتیجه م یتوان سلول را از اثرات مضر افزایش تراکم محافظت کرد

کلیدواژه ها:

کشت سلول ، سلول گرانولوزا ، گاو هلشتاین ، RIA ، PC