مقایسه دو روش القای ریشه ی مویین در گیاه سخت تلقیح گل راعی Hypericumperfuratum.l

در تحقیق حاضر دو روش دستورزی گل راعی Hypericum perfuratum که یکی از گونه های دارویی مهم و سرسخت نسبت به تراریختگی با آگروباکتریوم می باشد، مورد ارزیابی قرار گرفته است. در این مطالعه روش های غوطه وری در سوسپانسیون آگروباکتریوم رایزوژنز و تزریق مستقیم آگروباکتریوم در شرایط کاملا یکسان با هم مقایسه گردید. در روش غوطه وری از گیاهان دو ماهه جهت تهیه ی ریزنمونه های برگ و ساقه و جوانه ی انتهایی استفاده شد و با روش غوطه وری در سوسپانسیون آگروباکتریوم تلقیح انجام گردید. بعد از دو الی سه هفته در ریزنمونه های ساقه و در محل مایه زنی ریشه های ظریفی پدیدار گشت. در روش تزریق مستقیم نیز از گیاهان دو ماهه و با شرایط یکسان جهت القا استفاده گردید و در محل گره های ساقه، برگ و جوانه ی انتهایی تزریق سوسپانسیون آگروباکتریوم صورت گرفت. در روش تزریق مستقیم پس از چهار الی پنج روز در برخی از اندام های مورد تزریق ساقه و طوقه های گل راعی ریشه های کرکدار ظریفی با انشعابات فراوان پدیدار گشت. در نهایت ماهیت تراریختی ریشه های موئین با استفاده از تکنیک PCRو تایید حضور ژن rolBوrolC از قطعه T-DNA پلاسمید آگروباکتریوم تایید گردید.الکتروفورز محصولاتPCRتلفیق موفقT-DNAدر ژنوم ریشه های موئین را اثبات کرد. بر اساس نتایج به دست آمده روش تزریق مستقیم در هر دو حالت تلقیح با استوسیرینگون و بدون استوسیرینگون کارایی بیشتری در القای ریشه های مویین نسبت به روش غوطه وری در سوسپانسیون آگروباکتریوم دارا می باشد

کلیدواژه ها:

گل راعی ، غوطه وری ، تزریق مستقیم ، آگروباکتریوم رایزوژنز ، ریشه ی مویین