در باکتری اشریشیاکلی (scFv) بیان بالای یک آنتی بادی نوترکیب

سال انتشار: 1390
نوع سند: مقاله کنفرانسی
زبان: فارسی
مشاهده: 663

فایل این مقاله در 6 صفحه با فرمت PDF قابل دریافت می باشد

استخراج به نرم افزارهای پژوهشی:

لینک ثابت به این مقاله:

شناسه ملی سند علمی:

NBCI07_0371

تاریخ نمایه سازی: 29 شهریور 1394

چکیده مقاله:

قطعات آنتی بادی نوترکیب که با استفاده از تکنیکهای مهندسی ژنتیک به دست آمده اند می توانند جایگزین مناسبی برای آنتی بادی های مونوکلونال در زمینه های مختلف درمانی و تحقیقاتی باشند. تا کنون، مرسوم ترین نوع این آنتی بادی هایها بوده اند. با توجه به اینکه در برخی موارد نیاز به scFv ، بیان شده اند Escherichia coli نوترکیب که در باکتری مقادیر نسبتآ زیادی از این آنتی بادیها وجود دارد، اما میزان بیان این پروتئین های نوترکیب با توجه به توالی اسید آمینه های آنها و شرایط بیان بسیار متفاوت می باشد. در تحقیق پیش رو، نتایج حاصل از تولید قابل توجه یک آنتی بادی نوترکیبآورده شده است. بدین منظور، ابتدا ژن آنتی بادی نوترکیب درون یک وکتور بیانی تحت کنترل E. coli در باکتری (scFv) E. کلون گردید. سپس، بعد از القاء بیان ژن، میزان بیان این آنتی بادی نوترکیب در قسمتهای مختلف سلول T7 promoter ا ز قبیل سیتوپلاسم، پریپلاسم و پروتئین های نامحلول مورد بررسی قرار گرفت. در مرحله بعد پروتئین نوترکیب مورد coliنظر با استفاده از روش کروماتوگرافی میل جذبی خالص سازی شده و فعالیت بیولوژیک آن اندازه گیری شد. نتایج این آزمایش ب یان شده و تقریبآ 40 % از این پروتئین در E. coli نشان داد که آنتی بادی مورد نظر به میزان قابل ملاحظه ای در باکتری درون پریپلاسم باکتری تجمع پیدا کرده است. با مقایسه با تحقیقات قبلی، نشان داده شد که این آنتی بادی نسبت به آنتی ژن هدف خود از فعالیت قابل قبولی برخوردار می باشد.

نویسندگان

مهدی گلچین

گروه پاتوبیولوژی ، دانشکده دامپزشکی، دانشگاه شهید باهنر کرمان

علی اکبر خلیلی یزدی

گروه پاتوبیولوژی ، دانشکده دامپزشکی، دانشگاه شهید باهنر کرمان

محمد کارآموزیان

گروه پاتوبیولوژی ، دانشکده دامپزشکی، دانشگاه شهید باهنر کرمان

مراجع و منابع این مقاله:

لیست زیر مراجع و منابع استفاده شده در این مقاله را نمایش می دهد. این مراجع به صورت کاملا ماشینی و بر اساس هوش مصنوعی استخراج شده اند و لذا ممکن است دارای اشکالاتی باشند که به مرور زمان دقت استخراج این محتوا افزایش می یابد. مراجعی که مقالات مربوط به آنها در سیویلیکا نمایه شده و پیدا شده اند، به خود مقاله لینک شده اند :
  • Burgess, R.R. and Richard, RB.a.M.P., 2009. Refolding solubilized inclusion body ...
  • Ferrantelli F, Ruprecht RM. 2002. Neutralizing antibodies against HIV - ...
  • Sambrook J, Russell DW. 2001. Molecular cloning: a laboratory manual, ...
  • Sandermann H, Jr, Strominger JL. 1972. Purification and properties of ...
  • Schenk JA, Sellrie F, Bottger V, Menning A, Stocklein WF, ...
  • _ Schirrmann T, Al-Halabi L, Dubel S, Hust M. 2008. ...
  • Weisser, N.E. and Hall, J.C. 2009. Applications of single-chain variable ...
  • Wu S, Ke A, Doudna J A. 2007. A fast ...
  • نمایش کامل مراجع