بیان، تخلیص و بررسی ساختار سه بعدی آلفا-دفنسین- 1 انسانی

دفنسین ها پپتیدهای کاتیونی ضد میکروبی غنی از سیستئین می باشند که بعنوان عضوی از سیستم ایمنی ذاتی و اکتسابی در نظر گرفته می شوند، چرا که قادر به فراخوانی مونوسیت ها و نوتروفیل ها می باشند و در القاء تولید سایتوکاین های مختلف نقش موثری دارند. دفنسین ها توسط گروه های مختلفی از سلولها از جمله نوتروفیل ها و سلولهای ترشحی روده تولید می شوند و در in vitro فعالیت ضد میکروبی وسیعی را برعلیه باکتریهای گرم منفی و مثبت، قارچ ها و ویروسها نشان می دهند. با توجه به عملکرد وسیع این ترکیبات و پتانسیل دارویی آنها و همچنین به منظور بررسی سایر عملکردهای احتمالی،تولید این ترکیبات بصورت نوترکیب بمنظور دستیابی به روشی مقرون به صرفه در مقایسه باروش های سنتتیک ضروری بنظرمی رسد. از میان این ترکیبات، بدلیل اهمیت بالای آلفا -دفنسین ها بخصوص آلفا -دفنسین - 1 انسانی در تقویت سیستم ایمنی ذاتی و اکتسابی و اثرات آن بر روی نوتروفیل ها که خط اول دفاعی در سیستم ایمنی می باشند، تولید آن در دو سیستم پروکاریوتی pQE-30 و pET-23α مورد بررسی قرار گرفت که تولید آن تنها در سیستم pQE - 30 با موفقیت همراه بود. پپتید خالص شده به روش mass spectrometry تعیین هویت شد. از آنجایی که این پپتید بصورت نامحلول در باکتری پپتید خالص شده به روشبیان می شود، تشکیل ساختار سه بعدی آن به منظور دستیابی به پپتید فعال ضروری می باشد.تاخوردگی این پپتید بااستفاده از فرم اکسید و احیاء شده گلوتاتیون که تسهیل کننده اکسیداسیون سیستئین ها و تشکیل باند دی سولفیدی می باشد، صورت گرفت.

کلیدواژه ها:

آلفا-دفنسین- 1 انسانی ، سیستم بیانی پروکاریوتی ، ساختار سه بعدی