بیان ژن فاکتور FVIII انعقادی نو ترکیب انسانی در غدد شیری موش ها ترانس ژنتیک

سال انتشار: 1392
نوع سند: مقاله کنفرانسی
زبان: فارسی
مشاهده: 604

متن کامل این مقاله منتشر نشده است و فقط به صورت چکیده یا چکیده مبسوط در پایگاه موجود می باشد.
توضیح: معمولا کلیه مقالاتی که کمتر از ۵ صفحه باشند در پایگاه سیویلیکا اصل مقاله (فول تکست) محسوب نمی شوند و فقط کاربران عضو بدون کسر اعتبار می توانند فایل آنها را دریافت نمایند.

استخراج به نرم افزارهای پژوهشی:

لینک ثابت به این مقاله:

شناسه ملی سند علمی:

NBCI08_0681

تاریخ نمایه سازی: 29 شهریور 1394

چکیده مقاله:

هموفیلی یک بیماری ژنتیکی وابسته به جنس است و عموما افراد مذکر را درگیر می کندکه در حدود یک مورد از هر 10 هزار مورد تولد رخ می دهد. این بیماری در اثر نقص یا جهش در ژن فاکتور 8 یا ژن فاکتور 9 ایجاد می شود. ژن فاکتور 8 (FVIII)، ژن نسبتا بزرگی بوده و حدود 2351 اسید آمینه با 26 اگزون تشکیل شده و یک mRNA به طول 9 Kb را رونویسی می کند. هدف اساسی این مطالعه جداسازی و کلونینگ فاکتور FVIII نوترکیب انسانی و بیان آن در غدد شیری موش جهت بیان فاکتورVIII نوترکیب (rFVIII) بود. برای تهیه یک پلاسمید نو ترکیب یک قطعه برشی NotI از پلاسمید ناقل ژن فاکتور (PCMV5-hFVIII) از ژل آگاروز تخلیص و داخل پلاسمید pUCWAP6 ناقل پروموترهای اختصاصی بافت 4.1kbp mWAP در منطقه ~1.6 kbp mWAP 3 'UTR الحاق شد. سپس پلاسمید نو ترکیب پس از الکتروفورز ژل آگاروز تلخیص شده به درون هسته اولیه تخم های سفید کونمینگ بارور شده به طور هم زمان تزریق گردید. بیان فاکتور FVIII نو ترکیب توسط روش های RT-PCR ، الایزا، SDS-PAGE و وسترن بلات مورد بررسی قرار گرفت. یافته ها نتایج به دست آمده نشان دهنده بیان موفقیت آمیز ژن فاکتور FVIII و تولید آن در غدد شیری بود.

نویسندگان

طاهر محمدیان

گروه میکروبیولوژی ، دانشگاه آزاد اسلامی شهر قدس، تهران، ایران

حسین راثی

گروه میکروبیولوژی، دانشگاه آزاد اسلامی واحد کرج، آکادمی بیوتکنولوژی ژن گستر، کرج، ایران