تشخیص مولکولی عامل بیماری میوه سبز مرکبات و مقایسه آغازگرهای موجود جهت ردیابی بیماری در مناطق مرکبات خیز جنوب ایران

بیماری میوه سبز مرکبات یکی از خطرناک ترین بیماریهای مرکبات و به لحاظ آلودگی مناطق جنوبی کشور به پسیل آسیاییی مرکبات مهمترین عامل تهدید کننده مرکبات این مناطق به شمار میرود ..به منظور ردیابی و پایش بیماری میوه سبز مناطق مرکبات خیز جنوب ایران از نظر وجود بیماری و مقایسه آغازگرهای مولکولی موجود از 86 نقطه دراستان های هرمزگان-کرمان -سیستان وبلوچستان ، که مخنصات بوسیله دستگاه GPS ثبت شد نمونه هایی از برگهای درختان دارای علائم مشکوک و پسیل (با دستگاه دیوک) جمع آوری شد که از مجموع 736 نمونه جمع آوری شده از درختان دارای علائم مشکوک 71 نمونه از مناطق سرباز استان سیستان و بلوچستان ،ارزوئیه ، قادرآباد جنوب استان کرمان در بررسی با آزمون روش PCR مستقیم و PCR آشیانه ای قطعه مورد نظر (بسته به نوع پرایمر استفاده شده) تکثیر شد .که نشانگر آلودگی نمونه به عامل بیماری بود. همچنین از 422 نمونه پسیل جمع آوری شده 28 نمونه از منطقه سیرمند حاجی آباد هرمزگان آلودگی به عامل فرم آسیایی با آزمون به روش PCR مستقیم و PCR آشیانه ای مشاهده شد .همچنین جهت بررسی و تعیین سریعترین و بهترین آغازگر ، درقالب طرح فاکتوریل بین پرایمرهای A2/G5, CGO3/CGR5, F1/R1, F2/R2, OI/OI2C با آزمون PCR مستقیم وآشیانه ای اختلاف معنی داری از نظر عملکرد ، در بین پرایمرهای این تحقیق نشان داده شد . بر اساس جدول مقایسه میانگین ها پرایمر R1/F1 و R2/F2 با انجام آزمایش nestedPCR با میانگین 93/88 درصد نسبت به سایر پرایمرهای برتری نشان داد .و پرایمر CGO3F/CGO5R، با میانگین 82/75 بعد از پرایمر اول قرار دارد .پرایمر OI1 /OI2C نسبت به بقیه تیمارها با میانگین 14/38 14 ضعیف ترین عملکرد را نشان داد .با بررسی مقایسه جدول اثرات متقابل بین برگ وپسیل نشان میدهد که پرایمر R1/F1 و R2/F2 با آزمون بر روی پسیل، نسبت به سایر آغازگرها با میانگین 97 درصد برتری دارد.

کلیدواژه ها:

میوه سبزمرکبات ، پسیل ، پرایمر ، PCR