CIVILICA We Respect the Science
(ناشر تخصصی کنفرانسهای کشور / شماره مجوز انتشارات از وزارت فرهنگ و ارشاد اسلامی: ۸۹۷۱)
عنوان
مقاله

DNA Extraction by a Phenol-chliroform from blood and Effects of MgCl2, EDTA, storage time, and temperature on DNA

اعتبار موردنیاز: ۰ | تعداد صفحات: ۲ | تعداد نمایش خلاصه: ۲۹۳ | نظرات: ۰
سال انتشار: ۱۳۹۲
کد COI مقاله: NIAC01_042
زبان مقاله: انگلیسی
حجم فایل: ۲۵۳.۷ کلیوبایت
متن کامل این مقاله منتشر نشده است و فقط به صورت چکیده یا چکیده مبسوط در پایگاه موجود می باشد.
توضیح: معمولا کلیه مقالاتی که کمتر از ۵ صفحه باشند در پایگاه سیویلیکا اصل مقاله (فول تکست) محسوب نمی شوند و فقط کاربران عضو بدون کسر اعتبار می توانند فایل آنها را دریافت نمایند.

راهنمای دانلود فایل کامل این مقاله

اصل مقاله فوق در بانک مقالات سیویلیکا موجود نیست. مقالات کنفرانس‌های کشور توسط دبیرخانه‌های مربوط منتشر می‌شوند و در صورتی که اصل مقاله توسط دبیرخانه منتشر نشده باشد، امکان ارائه آن توسط سیویلیکا وجود ندارد. در صورتی که نویسنده این مقاله هستید، می‌توایند اصل مقاله را جهت درج در بانک مقالات به سیویلیکا ارسال نمایید.

خرید و دانلود PDF مقاله

متن کامل این مقاله منتشر نشده است و فقط به صورت چکیده یا چکیده مبسوط در پایگاه موجود می باشد.
توضیح: معمولا کلیه مقالاتی که کمتر از ۵ صفحه باشند در پایگاه سیویلیکا اصل مقاله (فول تکست) محسوب نمی شوند و فقط کاربران عضو بدون کسر اعتبار می توانند فایل آنها را دریافت نمایند.

مشخصات نویسندگان مقاله DNA Extraction by a Phenol-chliroform from blood and Effects of MgCl2, EDTA, storage time, and temperature on DNA

Ahmad Mahmoudi - Department of Animal Science, Young Researchers Club, Khorasgan (Isfahan) Branch, Islamic Azad University, Isfahan, Iran
Reza Motafeghi - Department of Animal Science, Young Researchers Club, Khorasgan (Isfahan) Branch, Islamic Azad University, Isfahan, Iran
Maryam Shahriar - Department of Entomology, Young Researchers Club, Khorasgan (Isfahan) Branch, Islamic Azad University, Isfahan, Iran

چکیده مقاله:

Objectives: We have compared three different methods extraction of DNA from blood. Many different methods and technologies are available for the isolation of genomic DNA. The purpose of this study was to test three different method for DNA extraction of blood based on existing Protocols for blood DNA extraction. In general, all methods involve disruption and lysis of the starting material followed by the removal of proteins and other contaminants and finally recovery of the DNA.Methods:Materials are need: Extraction buffer Proteinase K, Phenol-chloroform isoamyl alcohol, Chloroform isoamyl alcohol, Ice cold 95-100% ethanol(keep aliquot in the freezer), 70% Ethanol Ultrapure (DNA-& DNase-free) and water TE buffer.Triton X-100, Tween-20 and Tween-80 were bought from sina Gene. Other chemical used were analytical grad (siqma). Whole blood was collected in a vacutainer tube containing 100Ml of 15% EDTA. The simplified on mililieter of blood was treated with an eqval volume of low- salf buffer containing 10 mM Tris-HCl PH 7.6, 10 mM KCl, 2 mM EDTA (TKE) containing 4 mM MgCl2 (TKM). Twenty five microliters of NP-40 was added and the cells were lysed by inverting several times. The suspension was centrifuged at 1000g for 10min at room temperature (RT). The pellet of mostly leukocytes was saved and washed two more times with TKM buffer. The final pellet was resuspended in 0.2ml of TKM buffer. Fifteen microliters of 10% sodium dodecyl sulfate (SDS) was added, and the whole suspension mixed thoroughly and incubated for 5min at 55° C. After adding 75 μl of saturated NaCl ( ??? 6M) , the tube was mixed well and centrifuged at 12000g for 5min. The supernatant containd DNA, wich was precipitted using ethanol. DNA was redissolved in 0.5ml of 10 mM Tris-HCl, 1 mM EDTA, PH 8.0(TE). The yields of DNA were calculated from the absorbance at 260nm (Maniatis et al.,1982) and by comparison with a molecular weight DNA standard on an agarose gel stained with ethidium bromide.Results: Extraction of DNA with either NP-40 or Triton X-100 gave a high yield of undegraded DNA in less than an hour. The concentration of magnesium ion in the buffers was critical to obtaining intact, high molecular weight (HMW) DNA. Greater than 10 mM MgCl2 led to degradation. Addition of EDTA to the buffer inhibits this degradation. Preparation of DNA from blood stored at room temperature or incubated at 37°C for 24 hr resulted in the same amount and quality of DNA as from samples frozen at −70°C. DNA from blood samples that had undergone more than four freeze-thaw cycles was found to be partially degraded. The modified RM can be applied to extract DNA from as little as 10 μl of blood (340 ng of DNA) and from dried blood samples. DNA samples remained intact and undegraded for longer times when DNA was dissolved in higher concentrations of EDTA. Effect of Different Detergents in the Extraction of DNA from Blood Samples. Two kinds of detergent were used to study their effect in the extraction of DNA. One group lysed the red cells, resulting in a clear solution; the other.

کلیدواژه‌ها:

DNA extraction, Phenol-chloroform , blood

کد مقاله/لینک ثابت به این مقاله

برای لینک دهی به این مقاله، می توانید از لینک زیر استفاده نمایید. این لینک همیشه ثابت است و به عنوان سند ثبت مقاله در مرجع سیویلیکا مورد استفاده قرار میگیرد:
http://www.civilica.com/Paper-NIAC01-NIAC01_042.html
کد COI مقاله: NIAC01_042

نحوه استناد به مقاله:

در صورتی که می خواهید در اثر پژوهشی خود به این مقاله ارجاع دهید، به سادگی می توانید از عبارت زیر در بخش منابع و مراجع استفاده نمایید:
Mahmoudi, Ahmad; Reza Motafeghi & Maryam Shahriar, ۱۳۹۲, DNA Extraction by a Phenol-chliroform from blood and Effects of MgCl2, EDTA, storage time, and temperature on DNA, اولین کنفرانس بین المللی ایده های نو در کشاورزی, اصفهان, دانشگاه آزاد اسلامی واحد خوراسگان, http://www.civilica.com/Paper-NIAC01-NIAC01_042.html

در داخل متن نیز هر جا که به عبارت و یا دستاوردی از این مقاله اشاره شود پس از ذکر مطلب، در داخل پارانتز، مشخصات زیر نوشته می شود.
برای بار اول: (Mahmoudi, Ahmad; Reza Motafeghi & Maryam Shahriar, ۱۳۹۲)
برای بار دوم به بعد: (Mahmoudi; Motafeghi & Shahriar, ۱۳۹۲)
برای آشنایی کامل با نحوه مرجع نویسی لطفا بخش راهنمای سیویلیکا (مرجع دهی) را ملاحظه نمایید.

مدیریت اطلاعات پژوهشی

اطلاعات استنادی این مقاله را به نرم افزارهای مدیریت اطلاعات علمی و استنادی ارسال نمایید و در تحقیقات خود از آن استفاده نمایید.

مقالات مرتبط جدید

شبکه تبلیغات علمی کشور

به اشتراک گذاری این صفحه

اطلاعات بیشتر درباره COI

COI مخفف عبارت CIVILICA Object Identifier به معنی شناسه سیویلیکا برای اسناد است. COI کدی است که مطابق محل انتشار، به مقالات کنفرانسها و ژورنالهای داخل کشور به هنگام نمایه سازی بر روی پایگاه استنادی سیویلیکا اختصاص می یابد.
کد COI به مفهوم کد ملی اسناد نمایه شده در سیویلیکا است و کدی یکتا و ثابت است و به همین دلیل همواره قابلیت استناد و پیگیری دارد.