كارايي روشهاي مولكولي PCR , NCM-ELISA در تشخيص آلودگي خاك به باكتري Ralstonia solanacearum

[ كبري مسلم خاني ] -
[ جواد مظفري ] -
[ عزيزاله عليزاده ] -

خلاصه مقاله:

باكتري R. solanacearum عامل بيماري پژمردگي باكتريايي يكي از عوامل مهم كاهش دهنده محصول سيب زميني در مناطق گرمسير و نيمه گرمسير به شمار مي رود (Hayward, ( 1991 اين بيمار ي در سالها ي اخير در بسياري از استانهاي كشور خصوصا در مناطق جنوبي به شدت به محصول سيب زميني خسارت وارد نموده است( باقري خير آباد ي ۱۳۷۲ ). مبارزه با ا ين باكتري بدل يل دامنه ميزباني گسترده و نيز پراكندگي وسيع آن در خاكها ي مناطق مختلف و انتقال آن از طريق آبياري و غده هايي كه آلودگي پنهان دارند بسيار مشكل است. بهترين راه كنترل ا ين ب يماري كاشت بذور عار ي از بيماري در خاكها ي غير آلوده مي باشد . به منظور دست يابي به مزارع عاري از آلودگي بهR. solanacearum ا ستفاده از روشهاي دقيق و حساس تشخيص آلودگي در خاك حائز اهميت زيادي است . اين روشها م ي با يست علاوه بر دقت و سرعت از اختصاصيت بالا يي نيز برخوردار باشند تا بتوانند جمعيت NCM- ، هاي پايين جدايه هاي بيماريزا را در خاك رديابي نمايند. در اين تحقيق سه روش كشت روي محيط انتخابيPCR و ELISA بهمراه غني ساز ي مورد بررسي و مقا يسه قرار گرفتند . روش كشت رو ي محيط انتخابي به عنوان روش معمول در تشخيص اين باكتري همچنان مورد استفاده قرار مي گيرد. اخيرا نيز پيشرفتهاي قابل توجهي در تشخيص ا ين باكتر ي حاصل شده است بطور يكه محيط كشت SMSA بعنوان يكي از به تر ين محيطها ي كشت انتخابي براي رديابي اين پاتوژن معرف ي گردي ده است ( Englebrecht, ( 1994 علاوه بر آن روشها ي مولكولي
به همراه پيش غني سازي بعنوان يك روش NCM-ELISA تشخيص ا ين عامل ب يماري ن يز معرفي گرديده اند. روش سرولوژيكي در تشخ يص سلولها ي باكتر ي از خاك در سال ۱۹۹۸ معرف ي گرد يد. تكنيك PCR در سال ۱۹۹۲ برا ي تشخيص باكتري( 1992 R. solanacearum در غده بكار برده شد (Seal et al.,و پس از آن ايتو و همكاران از پرايمرهاي 759 و 760 به منظور رد ي ابي باكتر يR. solanacearum از خاك استفاده نمودند ( Ito et al,در اين تحقيق كارائي سه تكنيك ذكر شده فوق به همراه پيش غني سازي در تشخيص آلودگي خاك به )R. 1998 solanacearum مقايسه شد تا از طر يق ارائه روش مطمئن تشخيص آلودگي خاك گامي در جهت كنترل موثر اين بيماري در كشور برداشته شود.