استفاده از مایع کیست هیداتیک اصلاح شده جهت نگهداری طولانی مدت قارچ ها

زمینه و هدف: نگهداری بلند مدت قارچ ها امری ضروری می باشد. برای این کار روش های متفاوتی ذکر شده ، از جمله: نگهداری در آب، نگهداری در زیر روغن های معدنی ، انجماد خشک ، انجماد ( شامل : انجماد و نگهداری در 20 - درجه سانتی گراد ، انجماد و نگهداری در 80 - درجه سانتی گراد ، انجماد و نگهداری در داخل یا بالای نیتروژن مایع ( 150 – تا 196 – درجه سانتی گراد) و یا استفاده از محیط مایع تریپتوکیز سوی براث می باشد. یافته ها: مایع کیست هیداتیک یک مایع بیولوژیک شفاف یا زرد رنگ بوده که محتوی مواد مختلفی از جمله اسیدهای آمینه، الکترولیت ها و متابولیت های بیوشیمیایی و آنزیم ها می باشد. با توجه به وجود ترکیبات مغذی و آلی در این مایع برآن شدیم که بقای تعدادی از قارچ های درماتوفیت، کاندیدا آلبیکنس و آسپرژیلوس فومیگاتوس را در مایع کیست هیداتیک اصلاح شده در مقایسه با محیط استاندارد نگهداری طولانی مدت قارچها (محیط تریپتیک سوی براث، TSB ) بررسی نماییم. مواد و روش ها: 1 ) هر سه گونه قارچ بروی محیط کشت سابرودکستروز آگار حاوی کلرامفنیکل با و بدون سیکلوهگزامید کشت داده می شوند تا کلنی تازه از این قارچها بدست آید. 2 ) با جمع آوری جگرهای آلوده به کیست هیداتیت 3 ) محیط کشت Triptocase soy broth بصورت تجاری و پودر در بازار موجود می باشد 4 ) جهت کار در شرایط محیطی و دمایی مساوی مقداری مساوی از کلنی هر سه گونه قارچ مورد نظر در شرایط استریل با کمک آنس به هر دو محیط کشت منتقل می گردد. سپس با بستن درب ویال های حاوی این محیط ها و سیل کردن آنها ویال ها را در دمای منفی 70 درجه سانتیگراد قرار می دهیم. 5 ) بعد از یک ماه ویال ها را بیرون آورده و به مدت یک روز در دمای یخچال و سپس به دمای اتاق رسانده می شدند. 6 ) در شرایط استریل از کلنی موجود در محیط کشت های مربوطه بطور جداگانه در محیط کشت قارچ کشت داده و به مدت 3-2 هفته در دمای 28 درجه انکوبه می شوند. در این مدت روزانه محیط کشت ها از نظر رشد کلنی بررسی می شوند. 7 ) مجددا در ماه بعد ویال های حاوی کلنی قارچ ها از فریزر منفی 70 بیرون آورده می شوند و مراحل فوق تکرار می شود. این کار تا 6 ماه تکرار می گردد و توانایی رشد کلنی ها در این دو محیط کشت بررسی می گردد. نتیجه گیری: از نظر کیفی قارچ هایی که در محیط های نگهداری مایع خریداری شده بودید، رشد یکسانی را در محیط کشت با قارچ هایی که در محیط مایع ساخته شده ( اصلاح شده ) بودند نشان می دادند ( رشد یکسان در محیط کشت ).

کلیدواژه ها:

مایع کیست هیداتیک ، قارچ ، محیط کشت ، محیط تریپتیک سوی براث ، TSB