تعیین تیپ و آنالیز مولکولی ژن S1 ویروس برونشیت عفونی در جوجه های گوشتی استان اصفهان

در فاصله زمانی تابستان 1385 تا تابستان 1386 از گله های جوجه گوشتی واجد سندرم تنفسی مشکوک به برونشیت عفونی در استان اصفهان با اخذ تاریخچه نمونه نای اخذ شد . RNA ی ویروسی با کیت تخلیص RNA استخراج شد و در واکنش RT-PCR یک مرحله ای با پرایمرهای 2 uni 1 S و 2 XCE که برای ویروسهای برونشیت عفونی مشترک است، قطعه ای بطول 1200 جفت باز از ژن S 1 مورد تکثیر قرار گرفت سپس محصول RT-PCR برای شناسایی و تفریق تیپهای ماساچوست، 274 D و 4/91 به روش Nested PCR با پرایمرهای اختصاصی تیپ، تکثیر شد . درNested PCRسویه های رفرانس 274 D و 120 H ،4/91 با پرایمرهای اختصاصی تیپ، بترتیب، قطعاتی به طول Nested PCR ،، پنج جدایه در RT-PCR جدایه شناسایی شده در 7 جفت باز تولید کردند . از 975 ، 295 و 217 قطعاتی به طول 295 جفت باز همانند سویه های رفرانس 120 H و 2 جدایه قطعا تی به طول 975 جفت باز همانند سویه رفرانس 4/91 تولید کردند . سپس قطعه 1650 جفت بازی از ژن 1 S سویه های مربوط به تیپ 4/91 و ماساچوست تعیین توالی شدند . نتایج تعیین توالی ضمن تائید نتایج Nested PCR نشان داد سویه های متعلق به تیپ 4/91 شباهت بیشتری با سویه بیماریزای 4/91 دارند و سویه متعلق به تیپ ماساچوست شباهت زیادی با سویه واکسنیH120 نشان می دهد . علاوه براین، مقایسه توالی ژن S 1 سویه های 4/91 اصفهان با سایر سویه های رفرانس 4/91 نشان داد، سویه های اصفهان در برخی موقعیتهای نوکلئوتیدی و اسیدآمینه ای منحصر بفرد می باشند که اهمیت آنها بوضوح مشخص نیست . بهرحال، با تائید حضور تیپ 4/91 در استان اصفهان و با توجه به اختلاف حدود 25 درصدی سویه های 4/91 اصفهان با سویه واکسنی 120 H ، بنظر می رسد برای کنترل برونشیت عفونی یک راهبرد واکسیناسیون مناسب لازم است