چهارمين همايش ملي بيوتكنولوژي ايران (1384)

 

تهيه و ارزيابي آنتي بادي منوكلونال بر عليه فرم Native آنتي ژن Core ويروس هپاتيت C

نويسند‌گان:
محمدرضا آقا صادقي - بخش هپاتيت و ايدز_ انستيتو پاستور ايران_ تهران
سيد مهدي سادات - بخش هپاتيت و ايدز_ انستيتو پاستور ايران_ تهران
فرزين روحوند - بخش هپاتيت و ايدز_ انستيتو پاستور ايران_ تهران
صفيه اميني - بخش هپاتيت و ايدز_ انستيتو پاستور ايران_ تهران

خلاصه مقاله:

هپاتيت C يك معضل بهداشت جهاني است كه توسط ويروس هپاتيت سي (HCV) انتقال مي يابد. يكي از مهم ترين پروتئين هاي ساختماني اين ويروس، پروتئين Core مي باشد كه از نظر ژنتيكي و تكاملي بسيار حفاظت شده بوده و اين اولين آنتي بادي هاي قابل تشخيص در ميزبان، پس از آلودگي، بر عليه اين پروتئين ويروس ساخته مي شود. در حال حاضر، اندازه گيري ميزان كل اين آنتي بادي در خون (Total HCV Core) از اهميت بسزاي تشخيصي برخوردار گشته و از آنجا كه تا كنون ذرات شبه Nucleocapsid Particles) Core) تنها ذرات قابل رديابي ويروس HCV در خون بيماران مي باشند، نياز به آنتي بادي هايي كه قابليت تشخيص فرم طبيعي و فضايي آنتي ژن Core را دارا باشند بسيار ضروري است. از اين رو در تحقيق حاضر براي اولين بار با استفاده از آنتي ژن تهيه شده به شكل Native آنتي بادي منوكلونال تهيه گرديده است. بدين منظور پس از ايميونيزه، كردن موش هاي BALB/c با آنتي ژن Core تخليص شده به روش Native به ميزان 5µg و با كمك ادجوانت هاي كامل و ناقص فروند در سه نوبت تزريق داخل صفاتي، سلول هاي طهال موش هاي ايميونيزه در حضور PEG (پلي اتيلن گليكول) با سلول هاي ميلوما X63 ادغام گرديد. هيبريدهاي توليد كننده آنتي بادي جدا گرديده و در نهايت تعداد 19 كلون اختصاصي Core با زير كلاس هاي آنتي بادي IgG2b, IgG2a, IgG1, IgM به دست آمد. در ادامه، مطالعه ويژگي حساسيت و وضعيت اپي توپهاي مورد شناسايي آنتي ژن با استفاده از تست هاي اليزا و ايمونوبلانينگ مورد ارزيابي قرار خواهند گرفت تا مونوكونال هايي با قابليت تشخيص تفكيكي فرم خطي و فضايي اپي توپ هاي آنتي ژن HCV-Core مشخص گردد.

 

كلمات كليدي:

هپاتيت C، پروتئين Core، منوكلونال آنتي بادي، آنتي بادي خطي و فضائي


دریافت اصل مقاله: http://www.civilica.com/Paper-NBCI04-NBCI04_358.html