CIVILICA We Respect the Science
(ناشر تخصصی کنفرانسهای کشور / شماره مجوز انتشارات از وزارت فرهنگ و ارشاد اسلامی: ۸۹۷۱)

گواهی نمایه سازی مقاله همسانه سازی و بیان ژن LicBM2 کد کننده آنزیم بتاگلوکاناز در باکتری اشرشیای کلی

عنوان مقاله: همسانه سازی و بیان ژن LicBM2 کد کننده آنزیم بتاگلوکاناز در باکتری اشرشیای کلی
شناسه (COI) مقاله: NEWCONF01_224
منتشر شده در اولین کنفرانس بین المللی یافته های نوین در علوم کشاورزی، منابع طبیعی و محیط زیست در سال ۱۳۹۳
مشخصات نویسندگان مقاله:

حکیمه افشین - دانشجوی کارشناسی ارشد بیوتکنولوژی درکشاورزی، دانشگاه شهرکرد
ندا میرآخورلی - استادیار دانشگاه شهرکرد، رشته اصلاح نباتات و بیوتکنولوژی
بهناز صفار - استادیار دانشگاه شهرکرد، دانشکده علوم گروه ژنتیک
فریبرز خواجعلی - استاد دانشگاه شهرکرد،گروه علوم دام،تغذیه طیور

خلاصه مقاله:
بتاگلوکاناز یکی از مهمترین آنزیم های مورد استفاده در تغذیه طیور می باشد. با توسعه مهندسی ژنتیک، امروزه از باکتری ها برای تولید پروتیئنهای انسانی و دامی استفاده می شود. هدف از این تحقیق، بررسی بیان ژن بتاگلوکاناز همسانه سازی شده در ناقل بیانی و تولید این پروتئین نوترکیب در باکتری اشرشیاکلی بود تا امکان تولید آن به صورت صنعتی فراهم گردد. ژن بتاگلوکاناز با استفاده از پرایمرهای اختصاصی از ژنوم پلاسمید pBI جداسازی شد و در ناقل بیانی pET22b+ کلون گردید. جهت بیان پروتئین نوترکیب موردنظر، اشرشیاکلی سویه BL 21 حاوی ناقل به محیط کشت LB انتخابی حاوی آنتی بیوتیک آمپی سیلین 50 میکروگرم برمیلی لیتر تلقیح گردید. پس از نمونه گیری القاگر IPTG یک میلی مولار به محیط کشت باکتریایی BL افزوده شد. درزمان های 6، 4، 2 ساعت بعداز القا نمونه گیری انجام شد. پروتئین کل به روش رسوب گیری از باکتری BL 21 استخراج گردید و آشکارسازی پروتئین ها با استفاده تکنیک SDS-PAGE 12./. رنگ آمیزی کوماسی برلیانت بلو مورد بررسی قرارگرفت. در نمونه های القایی باند قوی پروتیئنی درمحدوه ی 25کیلودالتون نشانگر پروتئینی مشاهده شد درحالیکه درسلول های غیرالقایی باند ضعیفی مشاهده شد و همچنین نمونه های 2 و 4 ساعت بعد از القا باند قوی تری را نسبت به سایر زمانهای القا نشان دادند، این باند نشان دهنده ی بیان ژن بتاگلوکاناز در باکتری اشرشیاکلی می باشد.

کلمات کلیدی:
بتاگلوکاناز، آنزیم، تغذیه طیور، اشرشیاکلی

صفحه اختصاصی مقاله و دریافت فایل کامل: http://www.civilica.com/Paper-NEWCONF01-NEWCONF01_224.html