آزاده فضلی - دانشگاه آزاد اسلامی واحد کرج، ایران
سید علی پور بخش - آزمایشگاه رفرنس مایکوپلاسما، موسسه تحقیقات واکسن و سرمسازی رازی کرج، ایران
اسماعیل اصلی - آزمایشگاه رفرنس مایکوپلاسما، موسسه تحقیقات واکسن و سرمسازی رازی کرج، ایران
اعظم حدادی - گروه میکروبیولوژی، دانشگاه آزاد اسلامی واحد کرج، کرج، ایران

آلودگی کشتهای سلولی توسط مایکوپلاسماها مسئلهای مهم در فناوری کشت سلولی محسوب میشود. میزان بالایی از کشتهای سلولی آلوده به مایکوپلاسما اوراله هستند که عموماً توسط کارکنان آزمایشگاه صورت میگیرد. بنابراین شناسایی و تشخیص آن بهمنظور جلوگیری اززیانهای مهم به دنبال آلودگی با این ریزاندامگانهاMicroorganismبسیار حائز اهمیت است. هدف این مطالعه راه اندازی و بهکارگیری روش واکنش زنجیره پلیمراز بهعنوان روشی سریع، حساس و اختصاصی برای تشخیص مایکوپلاسما اوراله در آلودگیهای کشت سلولی و فراوردههای زیستشناختی است.مواد و روش کار: با بهکارگیری سویه استاندارد مایکوپلاسما اوراله، تستPCRبا استفاده از جفت پرایمرهای اختصاصی گونه مایکوپلاسما اوراله در ناحیه ژن16S rRNAراهاندازی گردید. 26 نمونه کشت سلولی مشکوک به آلودگی مایکوپلاسما ارجاعی به آزمایشگاه رفرنس مایکوپلاسما موسسه رازی پس ازاستخراجDNAمورد آزمایشPCRقرار گرفتند.تستPCRراهاندازیشده باDNA مایکو پلاسما اوراله دارای واکنش مثبت بود، در صورتی که با سایر گونههای مایکوپلاسما نظیر: مایکوپلاسما سالیواریوم، مایکوپلاسما هیورینیس، مایکوپلاسماآرژنین ، ی آکولوپلاسما لایدلاوی، مایکوپلاسما فرمنتانس، مایکوپلاسما پنومونیه و همچنین با اشریشیا کلی واسترپتوکوکوس پنومونیه واکنش نداد که نشاندهنده ویژگی بالای این تست بود. از تعداد 26 نمونه کشت سلولی 26 نمونه از نظر جنس مایکوپلاسما و 8 نمونه از نظر گونه مایکوپلاسما اوراله مثبت بودند.نتیجهگیری: با توجه به میزان بالای آلودگی کشتهای سلولی به مایکوپلاسما اوراله و ویژگی بالایتستPCRراهاندازیشده در این مطالعه، بهکارگیری این روش در تشخیص آلودگی کشتهای سلولی درآزمایشگاههای کشت سلولی توصیه میگردد.

مایکوپلاسما اوراله ، PCR،شناسایی، کشت سلول