شناسایی و تعیین سویه مایکوباکتریوم پاراتوبرکلوزیس MAP به روش PCR و REA بر اساس قطعات درون جایگیر IS900 و IS1311

هدف از این مطالعه شناسایی مایکوباکتریوم آویوم زیرگونه پاراتوبرکلوزیس ،(M. avium paratuberculosis بررسی درصد شیوع آلودگی به آن و همچنین بهینه سازی یک روش سریع، دقیق و ساده به کمک PCR برای تشخیص این زیرگونه و جدایه های آن بود مایکوباکتریوم آویوم زیرگونه پاراتوبرکلوزیس MAP از لحاظ اقتصادی عامل یکی از مهمترین بیماری ها در صنعت دامپروری به نام بیماری یون Johne's Disease می باشد، که یکی از عفونت های مزمن نشخوارکنندگان به شمار می رود. به منظور شناسایی این می باشد، که یکی از عفونت های مزمن نشخوارکنندگان به شمار می رود. به منظور شناسایی این DNA به منظور شناسایی نمونه های آلوده، قطعه درون جایگیر اختصاصی MAP به نام IS900 به طول 413 جفت باز، با استفاده از پرایمرهای P90 و P91 تکثیر شد. سپس به منظور تعیین جدایه گاوی و گوسفندی MAP نسبت به تکثیر قطعه درون جایگیرIS1311 با طول 268 جفت باز به کمک دو پرایمر 56 M و 94M اقدام شد. قطعات حاصله به کمک آنزیم HinfI هضم شدند. تعداد 107 نمونه از 243 نمونه مدفوع 44% و 10 نمونه از 56 نمونه شیر خام18% مورد مطالعه، آلوده به MAP بودند . از بین 56 نمونه شیر و مدفوع که از دام های یکسانی گرفته شده بودند 19 نمونه مدفوع و 10 نمونه شیر، آلوده شناسایی شدند ( 18 % در مقابل 34% ) نتایج هضم آنزیمی نیز نشان داد که تمامی MAP های شناسایی شده از جدایه گاوی می باشند.

کلیدواژه ها:

مایکوباکتریوم پاراتوبرکلوزیس ، بیماری یون ، . PCR-REA ، IS1311 ، IS900