شناسایی ساختار ژنی سوی ههای بومی باکتری Bacillus thuringiensis جداسازی شده از خاک های مناطق جنگلی استان مازندران

فعالیت حشره کشی باکتری Bacillus thuringiensis (B ناشی از تولید پروتئین هایی در طی فرآیند اسپورزایی است. هدف از این تحقیق ردیابی و توصیف ویژگ یهای ژن Cry1 عامل تولید پروتئین موثر روی لاروهای راسته ی Lepidoptera بود. نمونه برداری از خاک های مناطق جنگلی استان مازندران انجام شد. جداسازی بر اساس روش انتخابی استات سدیم صورت گرفت. بر مبنای شکل ظاهری کلنی ها و در ادامه رنگ آمیزی اختصاصی، 32 جدایه شناسایی شد. پس از بهین هسازی استخراج DNA پلاسمیدی، وجود این ژن با استفاده از یک جفت آغازگر اختصاصی مورد بررسی قرار گرفت. شش جدایه دارای این ژن شناسایی شده و از بین آنها چهار نمونه متعلق به خاک هایی از مناطق متفاوت برای آزمایش های بعدی انتخاب شدند. آزمایش های تعیین ساختار ژنی برای وجود چهار ژن Cry1A Cry1J ،Cry1I ،Cry1H ،Cry1G ،Cry1F ،Cry1E ،Cry1D ،Cry1C ،Cry1B و ژ نهای (Ad و Ac ،Ab ،Aa و Cry1K با استفاده از 14 جفت آغازگر اختصاصی انجام گردید. نتایج نشان داد که ژن Cry1I در هر چهار جدایه و ژ نهای ،Cry1Ac Cry1J و Cry1B ،Cry1Ad در سه جدایه وجود دارند. چهار ژن Cry1G ،Cry1E ،Cry1Aa و Cry1K در هیچکدام از جدای هها مشاهده نشد. سایر ژن ها در یک یا دو جدایه یافت شدند. نتایج این پژوهش نشان داد که از شیو ههای مولکولی م یتوان بخوبی برای توصیف ساختار ژنی سویه های Bt و آگاهی از خاصیت حشر هکشی آنها استفاده نمود. این شیوه های دقیق و سریع می توانند جایگزین مناسبی برای شیوه های سنتی و زمان بر مبتنی بر زیس تسنجی شوند.