شناسایی مورفولوژیکی و مولکولی جدایه های Botrytis cinerea عامل کپک خاکستری توت فرنگی در شمال ایران

توت فرنگی Fragaria ananassa Duchesn از مهم ترین گیاهان کشت شده در استان مازندران می باشد بیماری کپک خاکستری با عامل Botrytis cinerea از عوامل مهم خسارت زا به این محصول بوده که سالانه موجب خسارات زیادی به این محصول می گردد. این تحقیق به منظور شناسایی مورفولوژیکی و ژنتیکی جدایه های B. cinerea بدست آمده از مزارع مختلف استان مازندران انجام شد. جهت جداسازی قارچ عامل بیماری، میوه های آلوده پس از انتقال به آزمایشگاه و ضدعفونی سطحی با اتانول 07 % روی محیط آب آگار WA کشت داده شد. از کلنی های جدا شده بروش تک اسپور ، پس از 4 روز کشت هایی خالص با انتقال نوک هیف به محیط غذایی سیب زمینی دکستروز آگار PDA تهیه شد. در نهایت با آزمون های مورفولوژیکی 42 جدایه B. cinerea تشخیص داده شد. خصوصیات مورفولوژیکی مورد استفاده شامل رنگ کلنی، شکل رنگ و ابعاد کنیدیوفور، شکل و ابعاد اسکلروت ها بود. طول کنیدیوفورها 2999 - 662 میکرومتر و اندازه کنیدی ها 8 - 4 × 13 - 4 و ابعاد اسکلرت ها 8- 1 × 11-1 بود. DNA جدایه ها با روش CTAB جدا شده و به عنوان Template در واکنش PCR استفاده شد. آغازگر اختصاصی C729 جهت تکثیر DNA با استفاده از پارامتر های دمایی توصیه شده به کار برده شد. از نمونه استاندارد B. cinerea نیز به عنوان شاهد در این آزمون استفاده شد. تمامی جدایه ها موفق به تکثیر قطعه 077 جفت بازی شدند. نتایج حاصل از این مطالعه حاکی از اثبات مولکولی جدایه های B. cinerea توت فرنگی در شمال ایران می باشد.

کلیدواژه ها:

cinerea Botrytis ، C729 ، DNA ، PCR