تاثیر سطوح استوسرینگون بر کارایی ترانسفورماسیون گیاه برنج (Oryza sativa)

ترانسفورماسیون با استفاده از اگروباکتریوم بیازمند فعال شدن ژنهای vir دارد. اسوسرینگون دارای بالاترین تاثیر در القاء این ژن ها است. القاء ژن های بیماری زا تحت شرایط in vitro از طریق افزودن ترکیبات شیمیایی القلگر منجر به گسترش فرایند ترانسفورماسیون به گیاهان غیر حسحس به اگروباکتریوم می شود. در این پزوهش بذور برنج به روش in planta ترانسفورم شدند. بر این اساس بذور برنج به مدت 2 روز خیسانده و سپس سمت مریستم انتهایی بذر در مراحل اولیه جوانه زنی با سوزن mm 0/5 Φ آغشته به محلول آگروباکتریوم تلقیح شدند. بذور مذکور در شرایط تاریکی به مدت 9 روز در اتاقک رشد قرار گرفته تا جوانه بزنند و بعد از این مدت به منظور حذف باکتری با انتی بیوتیک سفوتاکسیم تیمار شدند. آزمایش دو سویه ی اگروباکتریوم EHA105 و LBA4404 حاوی پلاسمید pCAMBIAl105.1R و سه غلظت استوسیرینگون Mμ 200 ، 100 و 0 در محیط القایی باکتری به منظور ترانسفورماسیون رقم حسنی برنج در قالب طرح کامل تصادفی انجام شد. ارزیابی گیاهان توسط واکنش PCR انجام و ترانسفورماسیون ژنتیکی آنها تایید شد. آزمون هیستوشیمیایی گاس به منظور بررسی تظاهر ژن بتاگلوکورونیداز انجام شد. بر این اساس رنگ ابی در تعدادی از گیاهان ترانس ژنیک نمایان شد.نتایج نشاندهنده ی بیش ترین کارایی ترانسفورماسیون سویه ی EHA105 در حضور μM 100 استوسرینگون درون محیط کشت القایی زن های vir بود.

کلیدواژه ها:

Agrobacterium tumefaciens ، تراریخته سازی گیاهان ، روش in planta ، ژن های بیماریزا