کلونینگ و مقایسه توالی ژن توماتیناز از دو نژاد 1 و1.2 قارچ Fusarium oxysporum f. sp. Melonis

توماتیناز یک آنزیم مهم در تجزیه ترکیبات فیتوآلکسینی بشمار می‌رود. فیتوآلکسین ها به عنوان اولین سد دفاعی گیاه در مقابله با پاتوژن ها به شمار می‌رود. مطالعات اولیه نویسندگان حضور ژن توماتیناز را در نژاد 1 قارچ Fusarium oxysporum f. sp. melonis (FOM) تأیید نمود. این مطالعه با هدف مطالعه توانی کامل این ژن و بررسی تنوع آن در نژادهای 1 و 1.2 به‌عنوان دو نژاد رایج در ایران انجام شد. بدین منظور با استفاده از پرایمرهای اختصاصی PSh30-F/R توالی کامل ژن توماتیاز از DNA ژنومی دو نژاد مورد مطالعه تکثیر شد. باندهای تکثیر شده به اندازه 1.1 کیلوباز در وکتور pTG-19 کلون گردید. تکنیک کلنی PCR با پرایمرهای اختصاصی و پرایمرهای یونیورسال M13 به منظور تأیید کلونی های نه تکذیب به کار گرفته شد و به منظور تأیید نهایی توالی یابی به صورت دو جهت انجام شد. آنالیز داده‌های حاصل نشان داد که توالی تکثیر شده در دانشکده مربوطه ژن توماتیناز است این ترانه‌ها شباهت بالایی متوالی گزارش شده از ژن توماتیناز مربوط به فرم اختصاصی Fusarium oxysporum f. sp. lycopercisi نشان داد. این مطالعه به شناسایی چندین موتاسیون در توالی این ژن در نژادهای 1 و 1.2 منتج شد.

کلیدواژه ها:

توماتیناز ، کلونینگ ، تنوع ژنی ، قارچ Fusarium oxysporum f. sp. Melonis