بررسی مولکولی گیاهان تراریخت نسل T0 توتون حاوی ژن nptII

بررسی مولکولی گیاهان تراریخت در سطوح مختلف DNA RNA پروتئین و ... طی نسلهای مختلف یک گام کلیدی در توسعه لاین های گیاهی است که از نظر ژنتیکی پایدار باشند و سطح بیان ترنسژن در آنها مناسب باشد. مقاله حاضر بخشی از تحقیقی است که در آن ابتدا طراحی و تهیه سازه اختصاصی بذر و کلون کردن آن در ناقل گیاهی pBI121 انجام شده و سپس انتقال آن به ریزنمونه های برگی توتون با استفاده از اگروباکتریوم صورت گرفته است. برای آنالیز مولکولی گیاهان نسل T0 ، استخراج DNA ژنومی از برگهای جوان گیاهچه های سبز مانده در محیط گزینشگر انجام گرفت. با توجه به حضور ژن مارکر nptII در ناقل pBI121 با استفاده از آغازگرهای اختصاصی این ژن و واکنش PCR قطعه 795bp مربوط به ژن nptII مشاهده شد، که انتقال سازه مدنظر به ژنوم گیاه را تایید می کند. در مرحله بعد برای بررسی بیان ترنسژن nptII در سطح نسخه برداری، استخراج RNA از برگ و بذور نارس انجام گرفت و از آنها CDNA سنتز و بعداز PCR قطعه 795bp مربوط به ژن nptII در هر دو بافت مشاهده شد که نشان می دهد این ژن در سطح mRNA در هر دو بافت بیان می شود. از آنجائی که ژن nptII موجود در ناقل pBI 121تحت کنترل پیشبرنده عمومی NOS می باشد به همین دلیل بیان این ژن در تمام بافتهای مختلف گیاه مورد انتظار بود. قابل ذکر است که بررسیهای تکمیلی این گیاهان در دست انجام است.

کلیدواژه ها:

ژن nptll ، نسل T0 ، توتون تراریخت ، بررسی مولکولی