همسان سازی ژن آنزیم مونومریک سارکوزیت اکسیداز باکتری Bacillus coagulans در باکتری E.coli

استخراج به نرم افزارهای پژوهشی:

لینک ثابت به این مقاله:

شناسه ملی سند علمی:

CBGCONF03_152

تاریخ نمایه سازی: 8 آبان 1395

چکیده مقاله:

مونومریک سارکوزین اکسیداز EC1.5.3.1 یک پروتئین منومر است که به خانواده فلاووآنزیمها تعلق دارد این انزیم دارای 381 اسیدآمینه بوده و یک آنزیم کاتالیز کننده وابسته به اکسیژن که سارکوزین را به گلاسین، فرمالدئید و پراکسید هیدروژن تبدیل می کند و یک جزء کلیدی در بیوسنسور کراتینین است ودر ارزیابی عملکردکلیه و آسی عضله مورد استفاده قرار می گیرد در این تحقیق هدف همسانه سازی ژن مونومریک سارکوزین اکسیداز از Bacillus coagulans در E.coli Top10 می باشد. ابتدا ژن این آنزیم از باکتری Bacillus coagulans توسط PCR تکثیر شد سپس محصول PCR و وکتور بیانی pET28a توسط آنزیمهای برشی Xho1 و Nco1 برش داده شده و محصولات حاصل از هضم آنزیمی توسط آنزیم T4DNA ligase به هم متصل شده و محصول ligation وکتور نوترکیب درو باکتری E.coli مستعد شده ترانسفورم گردید و روی محیط لوریا برتانی LB آگار حاوی کانامایسین کشت داده شد . به منظور تایید صحت همسانه سازی colony PCR تعیین توالی و هضم آنزیمی و کتور نوترکیب استخراج شده با انزیمهای محدودگر Xho1 و Nco1 انجام گردید. نتایج تایید کننده همسانه سازی ژن آنزیم منومریک سارکوزین اکسیداز در وکتور pET28a در غالب صحیح می باشد.

کلیدواژه ها:

همسانه سازی ، انزیم مونومریک سارکوزین اکسیداز bacillus coagulans ، فلاووآنزیم

نویسندگان

زهرا محمدی آوین

دانشجوی کارشناسی ارشد دانشگاه آزاد اسلامی واحد علوم دارویی

زهرا امینی بیات

هیئت علمی پژوهشکده بیوتکنولوژی سازمان پژوهشهای علمی و صنعتی ایران

سپیده عباس زاده

دانشجوی کارشناسی ارشد سازمان پژوهشهای علمی و صنعتی ایران

مراجع و منابع این مقاله:

لیست زیر مراجع و منابع استفاده شده در این مقاله را نمایش می دهد. این مراجع به صورت کاملا ماشینی و بر اساس هوش مصنوعی استخراج شده اند و لذا ممکن است دارای اشکالاتی باشند که به مرور زمان دقت استخراج این محتوا افزایش می یابد. مراجعی که مقالات مربوط به آنها در سیویلیکا نمایه شده و پیدا شده اند، به خود مقاله لینک شده اند :
  • Wagner, Mary Ann, et al. "Monomeric sarcosine oxidase: 1. Flavin ...
  • Zhao, Gouhua, and Marilyn Schuman Jorms. "Ionization of zwitteriomc amine ...
  • Nishiya, Yoshiaki, and Tadayuki Imanaka. "Cloning and sequencing of the ...
  • Has san-Abdallah, Alshaimaa, Guohua Zhao, and Marilyn Schuman Jorms. "Role ...
  • . Zhao, Gouhua, et al. "Monomeric sarcosine oxidase: Role of ...
  • Tong, Yanjun, et al. "Novel affinity purification of monomeric sarcosine ...
  • Has san-Abdallah, Alshaimaa, et al. "Biosynthesis of covalently bound flavin: ...
  • Banks, Craig E., and Edward P Randviir. "Detection of creatinine: ...
  • Carobene, Anna, et al. "Evaluation of the impact of standardization ...
  • Hannig, Gerhard, and Savvas C. Makrides. "Strategies for optimizing heterologous ...
  • Trickey, Peter, et al. "Monomeric sarcosine oxidase: structure of a ...
  • نمایش کامل مراجع