بررسی ایمنی زایی زیر واحد ساختاری CssA نوترکیب از فاکتور کلونیزاسیون باکتری اشرشیا کولی انتروتوکسیژنیک

مقدمه: اشرشیا کولی انتروتوکسیژنیک علت اصلی اسهال در کودکان زیر 5 سال در کشورهای در حال توسعه و عامل مهم اسهال مسافرتی است. از فاکتورهای ویرولانس اصلی در این باکتری، فاکتورهای کلونیزاسیون هستند. این فاکتورها پروتئین هایی سطحی اند که برای اتصال باکتری به سلولهای اپیتلیال روده کوچک ضروری می باشند. یکی از شایعترین فاکتورهای کلونیزاسیون CS6 می باشد که دارای دو زیر واحد ساختاری CssA و CssB است که به نظر می رسد ناحیه انتهای کروبوکسیلی CssA در اتصال به سلولهای اپیتلیال رده نقشی کلیدی ایفا می کند. هدف: در این تحقیق همسانه سازی و بیان قسمت انتهای کربوکسیلی زیر واحد CssA در اشرشیا کلی و بررسی ویژگی های ایمونولوژیکی آن به عنوان یک کاندید واکسن مورد مطالعه قرار رفت. روش: اطلاعات مربوط به این ژن از بانک ژن استخراج و توالی کد کننده با استفاده از ترجیح کدونی در liEco بهینه شد. پس از سنتز، ژن در وکتور بیانی pET32a زیر همسانه سازی و بیان شد. صحت پروتئین نوترکیب با وسترن بلات تأئید شد. پس از تعیین تیتر آنتی بادی تولید شده در سرم موش، مطالعه ایمنی زایی پروتئین انجام گردید. نتایج بحث: نتایج الایزا نشان دهنده تولید تیتر بالای آنتی بادی بود. پیش انکوبه کردن سلول های روده ای Caco-2 با سرم موش ایمن شده، اتصال باکتری ار به این سلول ها تا حد قابل توجهی کاهش داد. با توجه به نتایج به دست آمده، پروتئین CssA نوترکیب می تواند به عنوان یک پروتئین ایمونوژن از اجزای مهم واکسن بر علیه ETEC باشد.

کلیدواژه ها:

اشرشیا کولی انتروتوکسیژنیک ، فاکتورهای کلونیزاسیون ، پروتئین نوترکیب ، کاندیدای واکسن