کلونینگ وبیان آنتی ژن LmSTI 1 انگل لیشمانیا در مخمر ساکارومیسس سرویزیه

سال انتشار: 1393
نوع سند: مقاله کنفرانسی
زبان: فارسی
مشاهده: 564

متن کامل این مقاله منتشر نشده است و فقط به صورت چکیده یا چکیده مبسوط در پایگاه موجود می باشد.
توضیح: معمولا کلیه مقالاتی که کمتر از ۵ صفحه باشند در پایگاه سیویلیکا اصل مقاله (فول تکست) محسوب نمی شوند و فقط کاربران عضو بدون کسر اعتبار می توانند فایل آنها را دریافت نمایند.

استخراج به نرم افزارهای پژوهشی:

لینک ثابت به این مقاله:

شناسه ملی سند علمی:

CIGS13_0052

تاریخ نمایه سازی: 7 بهمن 1393

چکیده مقاله:

انگلهای لیشمانیا عامل بیماریهای عفونی لیشمانیوز میباشند که منجر به طیف وسیعی از اختلالات شامل ضایعات پوستی تا عفونت سیستمیک کشنده میشوند. مطالعات اولیه بیان آنتیژنهای مختلف انگل لیشمانیا و همچنین بیان پروتئینهای هترولوگ را در زمینههای تشخیصی و واکسنسازی مورد برسی قرار دادهاند. در این مطالعه امکان بیان ژنLmSTI1پروتئین شوک حرارتی لیشمانیا ماژور) درمخمر ساکارومیسسسرویزیه مورد بررسی قرار گرفته است. به این منظور ژنLmSTI1سویهMHRO/IR/75/ERاستخراج وکلون شده در وکتورpUC18شکری و همکاران)، به صورت یک قطعه 1641 جفت بازی دارای محل شناسایی آنزیمهای محدودکننده EcoRI و BamHIبه ترتیب در ابتدا و انتهای قطعه، به روشPCRتکثیر یافت. قطعه تکثیر یافته در وکتورpYES2 با همان موقعیت آنزیمی و تحت کنترل پروموترGAL1 کلون و در باکتریEcoliسوشDH5αترانسفورم گردید. کلنی باکتریهای نوترکیب در محیط حاوی آمپیسیلین غربالگری و وکتور نوترکیبpYES-LmSTI1 از طریق واکنشهای آنزیمی و تعیین توالی مورد تائید قرارگرفت. وکتورpYES-LmSTI1 تائید شده از طریق الکتروپوریشن به سلولهایINVCs1-URAمخمری ترانسفورم گردید. کلنیهای مخمری ترانسفورم یافته در محیطYNBحاوی گلوکز و فاقد اوراسیل انتخاب شده و با انجامBack transformation و PCR بررویDNAاستخراج شده از این مخمرها با کمک دانههای شیشهای، مورد تائید بیشتر قرار گرفتند. القاء بیان ژن با استفاده از محیط حاوی گالاکتوز صورت گرفت و 12%SDS-PAGEو وسترن- بلاتینگ بر روی پروتئینهای استخراج شده نشان از بیان ژنLmSTI1در ساکارومیسس سرویزیه و در اندازهی مورد انتظار است که میتواند در زمینههای تشخیصی و واکسنسازی مورد استفاده قرار بگیرد

کلیدواژه ها:

نویسندگان

النا اسماعیل وندفرد

دانشگاه آزاد اسلامی واحد علوم و تحقیقات اراک

مهدیه شکری

دانشگاه آزاد اسلامی واحد علوم و تحقیقات اراک

مهدی شکری

انستیتو پاستور ایران، بخش ایمنولوژی

مینا ابراهیمی

انستیتو پاستور ایران، بخش بیوشیمی