همسانه سازی ژن مصنوعی کد کننده گلیکوپروتئین Hemagglutinin-Neuraminidase ویروس نیوکاسل در ناقل گیاهی

بیماری نیوکاسل یکی از مهمترین عوامل بیماریزا در ماکیان اهلی میباشد. گلیکوپروتئین(HN) Hemagglutinin-Neuraminidase یکی از ایمنوژن های سطحی در ساختمان ویروس بوده و یکی از اهداف اصلی آنتی بادیهای حفاظتی و خنثیکننده در برابر بیماری نیوکاسل به شمار می رود. تمایل جهانی برای تولید واکسنهای سالم تر و ارزانتر همسو با پیشرفتهای بیوتکنولوژی استفاده از گیاهان را به عنوان سکویی برای تولید آنتی ژنهای واکسن بلقوه به عنوان ایمونوژن را مطرح می کند. در این پژوهش با هدف تولید گیاهچههای کلزای تراریخت به عنوان ایمونوژن خوراکی پس از انجام مطالعات بیوانفورماتیک در طراحی و انتخاب اپیتوپهای ایمنوژن سازه نوترکیب وبهینهسازی جهت بیان درمیزبان گیاهی، قطعه ژنی سنتزی کدکننده پروتئینHNبا طراحی آغازگرها، در ناقل کلونینگpUC57 همسانه سازی و در ناقل گیاهیpBI1400تحت کنترل پروموتر اختصاصی بذر گیاه کلزاFatty Acid Elongaseزیرهمسانه سازی شد. تاییدهمسانهها با غربالگریPCR-و هضم آنزیمی و در نهایت توالی یابی صورت گرفت. بعد از حصول اطمینان از صحت کار همسانهها بهAgrobacterium tumefaciensسویهLBA4404منتقل شد و باکتریهای تراریخت با غربالگریPCR-تایید و آماده انتقال به گیاه شدند.باکتری تراریخت حاصل جهت بیان آنتیژن نوترکیب در بذور لاینهای تراریخت به ریزنمونه های گیاه کلزا منتقل خواهد شد و در نهایت ایمنیزایی آن در مدل حیوانی مرغ مورد ارزیابی قرار خواهد گرفت

کلیدواژه ها:

بیماری نیوکسل ، ناقل گیاهی ، ایمونوژن ، Hemagglutinin-Neuraminidase