جداسازی و بررسی الگوی بیان یک ژن مونوترپنسنتازی از گیاه دارویی سیاهدانه

سیاهدانه یکی از گیاهان دارویی مهم میباشد که انواع متعددی از متابولیتهای ثانویه مانند ترپنها را تولید میکند. مونوترپنها دارای کاربردهای فراوانی در صنعت و پزشکی میباشند. در مسیر بیوسنتزی مونوترپنها تحت عنوان مسیرMEPواقع در پلاستید ژنهای مختلفی دخیل میباشند که مونوترپنسنتازها تحت عنوان ژنهای محدودکننده سرعت واکنش در این مسیر شناخته شدهاند. در این تحقیق یک ژنمونوترپنسنتازی از گیاه سیاهدانه برای اولینبار جداسازی والگوی بیان آن بررسی شد. به منظورجداسازی ژن، آغازگرها براساس نواحی حفظشده پروتیینی طراحی شدند. با استفاده از تکنیک رونوشت بردارمعکوس و سپس واکنش زنجیرهای پلیمراز با استفاده ازcDNAبافت برگ به عنوان الگو، ژن کدکنندهی مربوط به یک مونوترپنسنتاز در سیاهدانه تعیین توالی شد. مقایسه توالی بهدستآمده با توالیهایموجود در پایگاههای اطلاعاتی نشان داد که توالیهای گیاهان سیاهدانه و تاجالملوک مربوط به خانواده آلاله بسیار به هم نزدیک میباشند.نتایج حاصل از بررسی بیان ژن مونوترپنسنتاز در تیمار با متیلجاسمونات0/1میلیمولار نشان داد که بیان این ژن در اثر تیمار بامتیلجاسمونات افزایش مییابد و در 72 ساعت به حداکثر بیان خود میرسد. با توجه به اینکه میزان بیان ژن مونوترپنسنتازها در سطحرونوشت با میزان مونوترپن مربوطه ارتباط مستقیم دارد بنابراین در مواردی که هدف بهدستآوردن و جداسازی یک ترکیب مونوترپنی خاص باشد میتوان از این زمان به عنوان زمان مناسب برای برداشت استفاده کرد

کلیدواژه ها:

سیاهدانه ، مونوترپنسنتاز ، بیان ژن ، گیاه دارویی ، Nigella sativa