کلونینگ و طراحی مستقیم تعیین جهت کلونینگ ژن فاکتورIXدر وکتور گیاهی
سال انتشار: 1393
نوع سند: مقاله کنفرانسی
زبان: فارسی
مشاهده: 1,009
فایل این مقاله در 5 صفحه با فرمت PDF قابل دریافت می باشد
- صدور گواهی نمایه سازی
- من نویسنده این مقاله هستم
استخراج به نرم افزارهای پژوهشی:
شناسه ملی سند علمی:
CIGS13_0340
تاریخ نمایه سازی: 7 بهمن 1393
چکیده مقاله:
بیماری هموفیلیBیکی از شایع ترین بیماریهای انعقادی ژنتیکی بوده که در نتیجه حذف و یا کاهش سطح فاکتورIXفعال در خون ایجادمی شود. درمان معمول این بیماری به روش جایگزین درمانی انجام میگیرد که شامل تزریق فاکتورIX مشتق شده از پلاسمای افراد نرمال و یا استفاده از فاکتورIX نوترکیب می باشد. یکی از روش های تولید شکل نوترکیب فاکتورIX استفاده از یک بیوراکتور کارآمد جهتاستفاده از یک بیوراکتور کارآمد جهت استفاده از یک بیوراکتور کارآمد جهتتولید محصول ژن است که امروزه از گیاهان به عنوان بیوراکتور و کارخانههای زیستی بطور گسترده ای استفاده میشود. لذا با هدف جداسازی ژن فاکتور انعقادیIX انسانی بدون جهش و کلونینگ صحیح آن در وکتور بیانی گیاهی، تکثیر ژن فاکتور انعقادیIX انسانی با استفاده از پرایمرهایhFIX-R و hFIX-F-BamHIاز کتابخانهcDNAکبدی صورت گرفت. محصول تکثیر شده باPfuپلیمراز، پس ازخالص سازی از ژل و آدنیله شدن در پلاسمیدpTZR/Tکلون گردید. پلاسمیدهای نوترکیب از باکتری هایE.coli DH5ترانسفورم شده استخراج و ژن فاکتورIX با استفاده از پرایمرهای درون وکتوریM13F-pUC و M13R-pUCدر دو جهت تعیین توالی گردیدند مقایسه این توالی با توالی ثبت شده این ژن در بانک ژنیNCBIنشان داد که قطعه کلون شده مربوط به ژن سنتز کننده فاکتور انعقادیIX انسانی و فاقد جهش می باشد. سپس قطعه مورد نظر آماده جایگزینی مستقیم و در جهت صحیح با ژنGusAدر وکتور بیانی گیاهی pBI121با دو آنزیمSacI و BamHIگردید. از این سازه می توان جهت بیان این ژن در سوسپانسیون سلول گیاهی و انتقال ژن مذکور به گیاه استفاده نمود
کلیدواژه ها:
نویسندگان
ملیکا فصیح فر
دانشجوی کارشناسی ارشد بیوتکنولوژی دانشگاه آزاد اسلامی سبزوار
جعفر وطن دوست
استادیار گروه زیست شناسی دانشگاه حکیم سبزواری
مراجع و منابع این مقاله:
لیست زیر مراجع و منابع استفاده شده در این مقاله را نمایش می دهد. این مراجع به صورت کاملا ماشینی و بر اساس هوش مصنوعی استخراج شده اند و لذا ممکن است دارای اشکالاتی باشند که به مرور زمان دقت استخراج این محتوا افزایش می یابد. مراجعی که مقالات مربوط به آنها در سیویلیکا نمایه شده و پیدا شده اند، به خود مقاله لینک شده اند :