تولید و تخلیص پروتئین الحاقیFoxp3-Fc(IgG)

سال انتشار: 1393
نوع سند: مقاله کنفرانسی
زبان: فارسی
مشاهده: 609

متن کامل این مقاله منتشر نشده است و فقط به صورت چکیده یا چکیده مبسوط در پایگاه موجود می باشد.
توضیح: معمولا کلیه مقالاتی که کمتر از ۵ صفحه باشند در پایگاه سیویلیکا اصل مقاله (فول تکست) محسوب نمی شوند و فقط کاربران عضو بدون کسر اعتبار می توانند فایل آنها را دریافت نمایند.

استخراج به نرم افزارهای پژوهشی:

لینک ثابت به این مقاله:

شناسه ملی سند علمی:

CIGS13_0523

تاریخ نمایه سازی: 7 بهمن 1393

چکیده مقاله:

چنین بنظر میرسد که موفقیت روشهای واکسیناسیون در ایمونوتراپی سرطان مثل واکسن سرطان سلول دندریتیک تحت تاثیر منفی شبکه قوی از اجزای سرکوبگر سیستم ایمنی هستند که یکی از آنها سلولهایفتنظیمی هستند. فاکتور نسخه برداریFoxp3 اختصاصی ترین مارکر سلولهایTتنظیمی است. در مطالعات متعددی پاسخهای ایمنی علیه سلولهایTتنظیمی بیان کنندهFoxp3 و حذف آنهامورد بررسی قرار گرفته است. از آنجاییکه این مطالعات قبلی نتوانستند با حذف ناقص سلولهایTتنظیمی بطور کارامد بر اثرات سرکوبگری آنها غلبه کنند, ما در پی ساخت واکسنهای موثرتری بر ضد سلولهایTتنظیمی هستیم که امیدواریم به کمک آنها روشهای ترکیبی ایمونوتراپی اثرات نتایج بهتری را در درمان سرطان نشان دهند. در این مطالعه ما استراتژی ساخت یک واکسنDNA و پروتئینمطابق آن را در پیش گرفتیم که منجر به افزایش عرضه آنتی ژن و پاسخهای ایمنی متعاقب آن میگرددFoxp3 ملحق شده بهFc(IgG) میتواند بطور موثری از طریق اندوسیتوز به واسطه گیرنده توسط سلولهای دندریتیک گرفته و به مولکولهایMHCI,IIعرضه شود.مواد وروشها: سازهDNA شامل بخشFCاز ایمونوگلوبولینG در الحاق باFoxp3طراحی شد. این سازهDNA به درون سلولهای HEK293ترانسفکت شد تا بیان آن از طریق میکروسکوپ فلوئورسنت و روش فلوسایتومتری بررسی شود. بیان اختصاصی این سازه نیزبا روش وسترن بلات مورد ارزیابی قرار گرفت. برای تولید پروتئین نوترکیب , سازه الحاقیFoxp3-Fcدر وکتورpET21aقرار داده شد وسپس سویهBL21باکتری اشریشیاکلی به عنوان سلول میزبان استفاده شد. بیان پروتئین نوترکیب الحاقی با روش وسترن بلات بررسی شد.در ادامه پروتئین الحاقی با روش رنگ امیزی معکوسSDS PAGEتخلیص گردید.

نویسندگان

ندا موسوی نیری

گروه بیوتکنولوژی, دانشکده علوم نوین , دانشگاه علوم پزشکی تبریز

نصرت الله ضرغامی

گروه بیوتکنولوژی, دانشکده علوم نوین , دانشگاه علوم پزشکی تبریز

جمشید حاجتی

گروه ایمونولوژی, دانشکده پزشکی, دانشگاه علوم پزشکی تهران

آرش معمارنژادیان

بخش هپاتیت و ایدز, انستیتو پاستور تهران