بیان هترولوگ پروتئین غیر فعال کننده ریبوزوم Ebulin1 از گیاه آقطی در باکتری E. Coli

پروتئین های غیرفعال کننده ریبوزوم یا RIPها خانوادهای از پروتئین ها با فعالیت آنزیمی N- گلیکوزیدازی روی rRNA می باشند که با حذف یک آدنین از rRNA سبب بازدارندگی سنتز پروتئین می شوند. گیاه دارویی آقطی با نام علمی Sambucus ebulus L از گونه های ارزشمند و دارویی شمال ایران می باشد. اولین RIP جداسازی شده از برگ های گیاه آقطی، ebulin1 می باشد که فعالیت بازدارندگی شدیدی روی سنتز پروتئین پستانداران نشان داده است. از طرفی مانع سنتز پروتئین گیاهان و باکتری ها نمی شود و همین امر آنرا کاندید مناسبی برای همسانه سازی و بیان در سیستم های باکتریایی و گیاهی می سازد. در این پژوهش، توالی نوکلئوتیدی رمزکننده ebulin1 از گیاه آقطی جداسازی و پس از همسانه سازی در ناقل بیانی pET28a(+) به درون سویه (BL21(DE3 باکتری E.coli منتقل شد. پس از تایید مولکولی محصولات همسانه سازی شده از طریق colony PCR و هضم آنزیمی به منظور بررسی بیان تراژن در سطح ترجمه، آنالیز SDS-PAGE انجام شد.

کلیدواژه ها:

پروتئین های غیر فعال کننده ریبوزوم ، ebulin1 ، آقطی ، E.coli ، همسانه سازی ، بیان پروتئین نوترکیب