تشخیص سایتومگالو ویروس با روش تکثیر هم دما به واسطه حلقه (LAMP)

پیش زمینه و هدف: سیتومگالوویروس انسانی یکی از اعضای خانواده هرپس ویروس هاست و به دنبال آن یکی ازشایع ترین عوامل ایجاد کننده ناهنجاری های مادرزادی مانند کری و عقب ماندگی ذهنی است. این ویروس ازعوامل ایجاد عفونت مادرزادی در نوزادان است. وقوع عفونت مادرزادی سیتومگالوویروس در موالید زنده توسطسیتومگالوویروس 0/2 تا 2/2 درصد برآورد شده است. عفونت مربوط به این ویروس در بیماران ضعف ایمنی مانند بیماران مبتلا به ایدز و بیماران دریافت کننده پیوند عضو، باعث ایجاد ناهنجاری موارد منتهی به مرگ میشود. تکنیک مولکولی تکثیر هم دما به واسطه حلقه( LAMP )روش تکثیری جدید جهت تشخیص می باشد. دراین مطالعه به بررسی روش LAMP در تشخیص بیماری مربوط به CMV پرداختیم.روش: در این مطالعه از یک دسته 6 تایی پرایمر اختصاصی ژن های 7US و 8US جهت شناسایی ویروساستفاده شد. تست LAMP اپتیمایز و حد تشخیص Limit of) Detection) و اختصاصیت بررسی گردید. اینمطالعه بر روی تعداد 100 نمونه سرم CMV IgG مثبت که از آزمایشگاه نور تهیه شده بود انجام شد.نتایج: تست LAMP اپتیمایز شده ، با اضافه کردن رنگ سایبر گرین به لوله حاوی واکنش LAMP ،با تغییررنگ به سبز، مشخص شد. همچنین محصول تکثیر شده بر روی ژل جهت تایید، الکتروفورز شد. میزان حدتشخیص این تکنیک 10 پارتیکل ویروس تعیین گردید. انجام تست اختصاصیت نیز با استفاده از روش online وDNA شش ارگانیسم دیگر ویژگی 100 درصد نشان داد. DNA نمونه ها به روش DNG استخراج گردید وتوسط واکنش LAMP تست گردید. از بین 100 مورد افراد IgG CMV مثبت، 5 نمونه با روش اپتیمایزشده LAMP ، مثبت شدند.بحث: این تکنیک نسبت به دیگر تکنیک های مولکولی، ارزان تر، سریعتر و اختصاصی تر است و از این تکنیکمیتوان با اطمینان بالایی در همه سطوح بالینی و حتی مناطق محروم و روستایی جهت تشخیص CMVDNA استفاده کرد.

کلیدواژه ها:

سایتومگالوویروس ، تکثیر هم دما به واسطه حلقه LAMP ، سرم IgG مثبت