حفظ ذخایر ژنتیکی کبوده (Populus alba) از طریق کالوس های حاصل از کشت بافت در شرایط فراسرد ( Cryopreservation)

کبوده (Populus alba) یکی از گونه های درختی سریع الرشد است. این پژوهش به منظور حفظ ذخایر ژنتیکی کلون های مطلوب این گونه درشرایط فراسرد انجام گردید. در این پژوهش، شاخه های صنوبر کبوده نخبه در باغ گیاهشناسی ملی ایران شناسایی و جمع آوری شدند. جوانه ها پس ازسترون سازی در محیط کشت شاخه زایی پایه DKW به همراه mgl-5 0/1 1 iP ، mgl-0/1 1 IBA و mgl-0/1 1 BA مستقر و شاخه های مناسب تولید شدند.دیسک های برگی با ابعاد کوچک از شاخه های تولید شده جدا گشته و در محیط کشت DKW با 15 تیمار هورمونی متفاوت در یک طرح کاملاً تصادفی با8 تکرار کشت شدند. پس از یک ماه،بهترین تیمار کالوس زایی محیط کشت DKW با 5،4-D mgl-1 1 بود. کالوس های حاصله، در دو محیط کشت مایع DKW 0 حاوی 0/4 مولار سوکروز و هورمون های متفاوت به عنوان پیش تیمار در شیکر انکوباتور با دمای 4 درجه سانتی گراد و سرعت rpm 120 به مدت یک هفته قرار گرفتند. سپس توده های سلولی کوچک جداشده از کالوس، از طریق دو روش کپسوله شدن آبگیری و شیشه ای شدن به نیتروژن مایع منتقل - / شدند پس از یک هفته ریزنمونه ها از نیتروژن مایع در حمام آبی 45 درجه به مدت 1 دقیقه قرار گرفته و پس از شستشو با سوکروز 1/2مولار به محیط (% 0/ کشت کالوس زایی حاوی ذغال فعال 1 W/V (و GA1 به میزان mgl-1 1 منتقل شده و در دو شرایط تاریکی و روشنایی در انکوباتور نگهداری شدند.بالاترین درصد زنده مانی سلول های این گونه در پیش تیمار محیط مایع فاقد ABA و کپسوله آبگیری و بهترین پس تیمار نگهداری در شرایط تاریکی 99% بدست آمد

کلیدواژه ها:

کالوس زایی ، کبوده (Populus alba) ، سلول ، فراسرد ، درون شیشه ای ) (in vitro