بررسی انواع روش های استخراج DNA از گیاه کرفس Apium graveolens

کرفس با نام علمی Apium graveolens گیاهی است علفی به ارتفاع 20 تا 60 سانتی متر که ساقه ای منشعب دارد قسمت مورد استفاده این سبزی قسمت های مختلف آن به ویژه ریشه و برگ آن است رفع سنگ کلیه، پایین آوردن فشار خون، آسان کننده هضم غذا، مقابله با سرطان و ... از جمله خواص درمانی کرفس می باشد. لذا بررسی ویژگی های مختلف از جمله استخراج DNA و بررسی ژنوم آن ضروری می باشد استخراج DNA ژنومی با کمیت و کیفیت بالا یکی از مهمترین نیازهای موجود در ژنومیکس به شمار می آید استخراج DNA به علت حضور پلی ساکاریدها، تانن ها، پلی فنول ها و سایر متابولیت های ثانویه به سهولت انجام نمی گیرد در این تحقیق 3 روش استخراج DNA موری تامسون، دویل و دویل و دلاپورتا و همکاران برای به دست آوردن DNA از بافت برگ گیاه کرفس مورد استفاده قرار گرفت. کیفیت و کمیت DNA استخراج شده با استفاده از اسپکتروفتومتری، الکتروفورز روی ژل آگارز و از طریق واکنش زنجیره ای پلیمزار (PCR) مورد بررسی قرار گرفت . با توجه به کمیت و کیفیت DNA استخراج شده و نتایج حاصل از الکتروفورز روی ژل آگارز بیشترین مقدار DNA از روش موری تامسون (424/4 میکرو گرم) حاصل شد که اختلاف معنی داری با سایر روش ها داشت. روش و دلارپوتا و همکاران (1983) از نظر مقدار DNA استخراج شده ضعیف ترین روش بود و کمترین مقدار DNA از این روش حاصل شد. همچنین نتایج حاصل از واکنش زنجیره ای پلی مراز نشان داد که DNA استخراجی توسط روش موری تامسون از کیفیت لازم برای PCR برخوردار است که وضوح و تعداد باندهای تکثیر شده در مقایسه با سایر روش های استخراج DNA ژنومی از این گیاه موید این موضوع می باشد.

کلیدواژه ها:

کرفس ، استخراج DNA ، موری تامسون ، دویل و دویل ، دلاپورتا