تراریخته سازی ریزنمونه های کلزا با استفاده از آگروباکتریوم حاوی سازه ژنی pCAMBIA3301-SeNH

تنش شوری یکی از مهمترین تنش های غیرزنده محدود کننده ی رشد گیاهان در جهان محسوب می شود. در سراسرجهان حدود 930 میلیون هکتار از زمین های زراعی که بیش از 6 درصد کل زمین های جهان را تشکیل میدهد تحتتاثیر تنش شوری قرار دارند و این درصد روزانه با تغییرات آب و هوایی منتج از فعالیت های طبیعی و انسانی افزایش مییابد. همچنین بیش از 35 میلیون هکتار اراضی کشور ایران با درجات مختلفی تحت تاثیر شوری قرار دارند که در اقلیم-های مختلف پراکنده شده اند. مساحت اراضی شور به میزان 89 / 32 و 43 / 16 درصد در استان های خوزستان و فارس، تا36 / 1 درصد در استان آذربایجان شرقی متغییر است. تنش شوری در گیاهان به وسیله ی عوامل مهمی چون سمیتیونی، تنش اسمزی، عدم تعادل یونی یا تغذیه ای و فرایندهای متابولیکی حاصل می شود. گیاهان به منظور کنترلهمئوستازی یونی جهت حفاظت در مقابل آسیبهای ناشی از تجمع شوری دارای آنتی پورترهایی همانند مسیر sos ،HKT و NHX ها می باشند. آنتی پورترهای NHX موجود در غشاء واکوئل و همچنین غشاء پلاسمایی (مسیر sos) نقشتعیین کنندهای در تبادل +Na و +H در سراسر غشاء دارند و از تجمع مقادیر سمی +Na در داخل سلول جلوگیریی می-کنند. روشهای مولکولی و انتقال ژن می توانند جهت ایجاد ارقام متحمل به شوری و کاهش اثرات زیان بار آن مناسبباشند، که ژن SeNHX1 کاندید مناسبی به همین منظور می باشد. در این پژوهش سازه ی ژنی pCAMBIA3301-SeNH ،حاوی ژن SeNHX1 از طریق آگروباکتریوم سویه LBA4404 به ریزنمونههای کلزا منتقل شد و پس از باززا شدنریزنمونه ها و تشکیل گیاهچه به منظور تایید مولکولی گیاهان تراریخته احتمالی در سطح DNA و RNA به ترتیبآزمون PCR و RT-PCR با استفاده از پرایمرهای اختصاصی F3SeNHX1 و R3SeNHX1 ، انجام گرفت که حضور ژنSeNHX1 و همچنین بیان آن در ژنوم گیاهچه ها تایید گردید.

کلیدواژه ها:

شوری ، ژن SeNHX1 ، گیاهان تراریخته احتمالی ، باززایی