مطالعه اثرات ضد قارچی اسانس آویشن باغی (Thymus vulgaris L.) علیه آسپرژیلوسفومیگاتوس در شرایط آزمایشگاهی

مقدمه: آویشن باغی یکی از قدیمیترین گیاهان دارویی و ادویهای است. تیموس (Thymus (کلمهای یونانی و به معنای شجاع است. آویشن باغی گیاهی خشبی، چند ساله و متعلق به خانواده نعناع (Lamiaceae (میباشد. منشا این گیاه نواحی مدیترانه گزارش شده است. اسانس این گیاه سرشار از ترکیبات فنولی و روغن های فرار می باشد. که دارای اثرات ضد قارچی و ضد میکروبی و همچنین ضد سرفه وخلط آور است. روش کار: در این مطالعه اسانس بدست آمده از آویشن باغی جهت بررسی فعالیت ضدقارچی علیه آسپرژیلوس فومیگاتوس به روش مایکرودایلوشن براث استفاده شد. بدین منظور ابتدا 100 گرم آویشن باغی آسیاب و به وسیله دستگاه کلونجر اسانس آن تهیه گردید. برای مطالعه رفتار رشد قارچ مورد نظر و تعیین حداقل غلظت ممانعتکنندگی از رشد(MIC (و نیز حداقل قدرت قارچکشی (MFC (اسانس آویشن باغی از روش های استاندارد ماکرودایلوشنبراث (رقیقسازیدر محیط مایع) استفاده شد. برای رقتسازی در لوله، ابتدا محیط سابورو دکستروز براث به میزان 5 سیسی به 11 لولهونوجکت اضافه شد. مقدار 100 میکرولیتر اسانس به 9/9 سیسی سابورو دکستروز براث در لوله اول اضافه گردید بعد از شیکر دادن لوله، مقدار 5 سیسی از لوله اول به لوله دوم و سپس به لوله بعدی و درنهایت تا لوله دهم تکرار شد در هر 1 لوله سریالهای 2رقت لوله قبلی تهیه گردید. دو لوله هم به عنوان شاهد در نظر گرفته شد. غلظتهای به دست آمده از0/01 و 0 /03 ،0/07 ،0/15 ،0/31 ،0/62 ،1/25 ،2/5 ،5 ،10 شامل براث دکستروز سابورو کشت محیط در اسانس هرمیکرولیتر بر میلیلیتر به دست آمد (رقتسازی در سه تکرار انجام شد). برای تهیه سوسپانسیون قارچی ابتدا قارچ روی محیط کشت جامد سابورو دکستروز آگار کشت دادهشد و در دمای 25 درجهی سانتیگراد به مدت 4-3 روز نگهداری شد سپس از کلنیهای رشد کرده، سوسپانسیون قارچی تهیه گردید برای این کار به سطح کلنی رشد کرده در محیط جامد، مقداری سرم فیزیولوژی اضافه و بعد از مدتی با پیپت پاستور استریل از سطح محیط برداشته شد. از کلنی خالص قارچآسپرژیلوس فومیگاتوس ایجاد شده در محیط کشت نمونه ای تهیه گردید و به سرم فیزیولوژی دارای تویین80 اضافه شد. بعد از جداسازی اسپور، برای تهیه سوسپانسیون قارچی با استفاده از دستگاه اسپکتروفتومتر در طول موج520 نانومتر میزان عبور نور از سوسپانسیون، مورد سنجش قرار گرفت (میزان عبور نور 90 %برای به دست آوردن سوسپانسیونی با 6 تقریبا 10 اسپور قارچی در هر میلیلیتر مورد نیاز است). در نهایت به هر کدام از لوله ها مقدار 10میکرولیتر ازسوسپانسیون قارچی اضافه گردید و 24-48 ساعت در انکوباتور نگهداری شد. بعد از این مدت با روش کدورت سنجی چشمی کمترین رقتی که کدورتی در آن مشاهده نشد MIC در نظر گرفته شد و از MIC و دو رقت کمتر روی محیط سابورو دکستروز آگار کشت داده شد و بعد از انکوباسیون رقتی که هیچ گونه رشدی روی محیط جامد نداشت به عنوان MFC به دست آمد. حداقل غلظت ممانعت کننده از رشد (MIC (و حداقل قدرت قارچکشی (MFC (اسانس آویشن باغی به ترتیب 0005/0±009/0 و 011/0±016/0میکرولیتر بر میلیلیتر اندازهگیری گردید.بحث و نتیجه گیری: نتایج این تحقیق حاکی از تاثیر اسانس آویشن باغی بر روی قارچ مورد آزمایش بود.

کلیدواژه ها:

اسانس آویشن باغی ، آسپرژیلوس فومیگاتوس ، ضدقارچی