مقایسه روش های متفاوت استخراج DNA و ایجاد روش Simplex PCR به منظور شناسایی باقیمانده DNA ژنومی در فرآورده های رب گوجه فرنگی

سال انتشار: 1396
نوع سند: مقاله ژورنالی
زبان: فارسی
مشاهده: 412

فایل این مقاله در 10 صفحه با فرمت PDF قابل دریافت می باشد

استخراج به نرم افزارهای پژوهشی:

لینک ثابت به این مقاله:

شناسه ملی سند علمی:

JR_AMFI-3-3_002

تاریخ نمایه سازی: 1 مرداد 1397

چکیده مقاله:

امروزه با پیشرفت علم بیوتکنولوژی و روشهای مولکولی به منظور بررسی ارگانیسم های موجود در فرآورده های غذایی از DNA مارکرها و واکنش زنجیرهای پلیمراز( PCR) 1 استفاده میشود. ازآنجایی که کیفیت DNA برای تمامی آنالیزهای ژنتیکی که بر روی مارکرهای مولکولی پایه ریزی شده باشد اهمیت زیادی دارد، روش استخراج DNA ژنومی باکیفیت بالا حایز اهمیت است. در بیشتر روشهای استخراج DNA ژنومی سه نکته اساسی مدنظر است که شامل کیفیت DNA استخراج شده، سرعت روش و میزان محصول آن میباشد. در این مطالعه 6 روش برای استخراج DNA از فرآورده های گوجه فرنگی به منظور مطالعه تقلبات غذایی و بررسی حضور گوجه فرنگی دست ورزی ژنتیکی شده (GMO)، استفاده شد و درنهایت پس از انتخاب مناسب ترین روش، نمونه DNA ژنومی جهت بررسی توسط پرایمرهای اختصاصی ناحیه D-loop میتوکندریایی مورداستفاده قرار گرفت. نتایج : در این مطالعه پس از بررسیهای کمی و کیفی از طریق الکتروفورز و استفاده از دستگاه نانودراپ مشخص شد که از بین روشهای استخراج DNA ژنومی بررسی شده، روش Wizard بر پایه اتصال اختصاصی DNA به غشاهای سیلیکایی (ستون) برای استخراج DNA رب گوجه فرنگی مناسب ترین است. پس از استخراج DNA از ربگوجه فرنگی، قطعه مارکر 280 جفت بازی از ناحیه D-Loop میتوکندریایی گوجه فرنگی با استفاده از جفت آغازگرهای اختصاصی گوجهفرنگی طی واکنش زنجیره ای پلیمراز به طور اختصاصی تکثیر شد و نتایج نشان داد که DNA رب گوجه فرنگی قابل تکثیر با آغازگرهای اختصاصی گوجه فرنگی میباشد. نتایج مطالعه انجام شده نشان داد میتوان انواع نمونه های گوجه فرنگی را قبل و بعد از فرآوری از جهت بررسی تقلبات غذایی در رب گوجه فرنگی و حضور گوجه ترانس ژنتیک در مواد غذایی ترکیبی و فراوری شده موردبررسی قرارداد.

کلیدواژه ها:

استخراج DNA ژنومی ، فرآورده های گوجه فرنگی ، DNA مارکر ، D-Loop میتوکندریایی

نویسندگان

مرمر یزدانی

گروه زیست شناسی، واحد تهران مرکزی دانشگاه آزاد اسلامی، تهران، ایران

اردشیر حسام پور

گروه زیست شناسی، واحد تهران مرکزی دانشگاه آزاد اسلامی، تهران، ایران