تولید آنتی بادی پلی کلونال علیه سلول های P388D1

سال انتشار: 1383
نوع سند: مقاله ژورنالی
زبان: فارسی
مشاهده: 373

فایل این مقاله در 9 صفحه با فرمت PDF قابل دریافت می باشد

استخراج به نرم افزارهای پژوهشی:

لینک ثابت به این مقاله:

شناسه ملی سند علمی:

JR_FEYZ-8-4_002

تاریخ نمایه سازی: 29 مهر 1398

چکیده مقاله:

سابقه و هدف: تکنیک های هم کشت (co-culture) در مطالعه تاثیرات متقابل سلول ها نقش مهمی دارند. قابلیت افتراق بین جمعیت های سلولی هم کشت شده در ارزیابی این نوع کشت نقش اساسی دارد. سلول های P388D1 از گروه سلول های شبه ماکروفاژی هستند ولی ظاهری شبیه لنفوبلاست دارند. در ارزیابی هم کشت سلول های P388D1 و سلول های مغز استخوان، تفاوت در آنتی ژن های سطحی این دو جمعیت سلولی می تواند به افتراق آن ها کمک کند. هدف از این تحقیق تهیه آنتی بادی است که بتوان به وسیله آن سلول های P388D1 را از سلول های مغز استخوان افتراق داد. مواد و روش ها : جهت تهیه آنتی بادی علیه سلول های P388D1 ایمن سازی خرگوش به وسیله تزریق داخل صفاقی و داخل وریدی این سلول ها انجام شد. بعد از خون گیری، ایمونوگلوبولین های سرم خرگوش به دفعات متعدد در محلول سولفات آمونیوم رسوب داده شدند. قبل و بعد از رسوب دهی، الکتروفورز پروتیین های سرم و تعیین مقدار آن ها با روش برادفورد انجام شد. آنتی بادی های دارای واکنش متقاطع با سلول های مغز استخوان به وسیله چندین بار عمل جذب توسط سلول های مغز استخوان حذف شدند. در مراحل مختلف جذب، حضور آنتی بادی های ضد سلولی با استفاده از روش ایمونوفلورسانس غیر مستقیم تعیین گردید و قدرت کشندگی آنتی بادی ها با واسطه کمپلمان نیز مورد ارزیابی قرار گرفت.یافته ها: محلول آنتی بادی جذب شده ای که در آزمایشات ایمونوفلورسانس غیر مستقیم هیچ واکنشی علیه سلول های مغز استخوان نشان نمی دهد، واجد آنتی بادی هایی بر علیه سلول های P388D1 می باشد که قادر به کشتن با واسطه کمپلمان این سلول ها می باشند.نتیجه گیری و توصیه ها: آنتی بادی های تهیه شده در این تحقیق را می توان به منظور تعیین جمعیت سلول های P388D1 یا حذف این سلول ها از جمعیت سلول های مغز استخوان استفاده نمود.

کلیدواژه ها:

نویسندگان

مرتضی سلیمیان

دانشگاه علوم پزشکی کاشان، دانشکده پیراپزشکی

زهرا سهیلی

مرکز تحقیقات مهندسی ژنتیک و فراورده های زیستی، تهران

بهرام گلیایی

مرکز تحقیقات بیوشیمی و بیوفیزیک، آزمایشگاه بیوفیزیک و بیولوژی مولکولی، تهران